Изучение токсико-фармакологических свойств комплексной пробиотико-ферментной кормовой добавки для птицеводства
ART 86208
Авторы:
Л.
О. Пономарева, Ю.
А. Лысенко
Л.
О. Пономарева, Ю.
А. Лысенко Библиографическое описание статьи для цитирования:
Пономарева
Л.
О.,
Лысенко
Ю.
А. Изучение токсико-фармакологических свойств комплексной пробиотико-ферментной кормовой добавки для птицеводства // Научно-методический электронный журнал «Концепт». –
2016. – Т. 11. – С.
956–960. – URL:
http://e-koncept.ru/2016/86208.htm.
Аннотация. В работе представлены результаты изучения токсикологических свойств жидкой комплексной пробиотико-ферментной кормовой добавки, состоящей из штаммов Lactobacillus acidophilus, Bacillus subtilis и Ruminococcus albus, на цыплятах-бройлерах и нелинейных белых лабораторных мышах путем изучения её острой и хронической токсичности.
Ключевые слова:
поведение, цыплята-бройлеры, мыши, кормовая добавка, острая токсичность, хроническая токсичность, морфология крови, биохимия крови
Текст статьи
Пономарева Лилия Олеговна,студент, ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет», Краснодарponomarewa123@yandex.ru
Лысенко Юрий Андреевич,к.б.н, доцент, ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»,Краснодарyuraduban45@mail.ru
Изучение токсикофармакологическихсвойств
комплексной пробиотикоферментной кормовой добавки для птицеводства
Аннотация.Вработе представлены результаты изучения токсикологических свойств жидкой комплексной пробиотикоферментной кормовой добавки, состоящей из штаммов Lactobacillusacidophilus, Bacillussubtilisи Ruminococcusalbusна цыплятахбройлерах и нелинейных белых лабораторных мышах путем изучения острой и хронической её токсичности.Ключевые слова:кормовая добавка, острая токсичность, хроническая токсичность, мыши, цыплятабройлеры, морфология крови, биохимия крови, поведение.
Решение главной народнохозяйственной проблемы –обеспечение населения продуктами питания –напрямую связано с развитием животноводства, в частности птицеводства. Всвязи сэтим важной целью государственной аграрной политики страны вперспективе до 2020г. является эффективное импортозамещение на отечественном рынке птицеводческой продукции. Потребление мяса будет практически полностью удовлетворяться за счет отечественного производителя. Это требует внедрения инновационных технологий в содержание и питание сельскохозяйственнойптицы[1].В условиях ведения интенсивного промышленного птицеводства возникает высокая вероятность развития в хозяйствах условнопатогенных и патогенных микроорганизмов. Это требует систематического применения антибиотиков и химиотерапевтических препаратов, приводящее к повышению антибиотикорезистентности некоторых патогенных штаммов и широкому распространению желудочнокишечных заболеваний, которые являются основной причиной гибели молодняка[1].Предотвратить развитие многих патологий позволяет использование кормов, обогащенных биологически активными пробиотическими добавками –стабилизированными культурами микроорганизмов и продуктов их ферментации, обладающие свойством оптимизировать кишечные микробиоценозы, подавлять рост и развитие патогенной и условнопатогенной микрофлоры, повышать обменные процессы и защитные реакции организма, активизируя клеточный и гуморальный иммунитет[2].В настоящее время на рынке пробиотиков востребованы поликомпонентные препараты, состоящие из нескольких штаммов бактерий или включающие добавки, усиливающие действие микроорганизмов, повышающие перевариваемость и усвояемость кормов, стимулирующих рост и развитие животных. Современный подход в разработке пробиотических препаратов и добавок подразумевает применение различных видов микроорганизмов в определенных сочетаниях. Спектр микроорганизмов, используемых для полученияпробиотиков, достаточно широк[3].
Разработка и внедрение новых биотехнологических препаратов и добавок, альтернативных кормовым антибиотикам, является актуальной в решении важной народнохозяйственной проблемы обеспечения населения России экологически безопасной продукцией птицеводства.Целью данной работы являлось изучение токсикологических свойств комплексной пробиотикоферментной кормовой добавкидля использования в птицеводстве.Работа проведена при поддержке Фонда содействия развитию малым формам предприятий в научнотехнической сфере.Материалы иметоды исследований.Токсикологическая оценка штаммов Lactobacillusacidophilus, BacillussubtilisиRuminococcusalbus, а также их совместное использование вкормовой добавкипроводилась на цыплятахбройлерах и нелинейных белых лабораторных мышах по средствам изучения острой и хронической токсичностисогласно ГОСТРИСО 10993112009.Все лабораторные животные находились в стандартных условиях вивария, имели свободный доступ к воде, нормальный температурный и световой режимы, содержались в клетках с древесной стружкой в качестве подстилки и получали лабораторный гранулированный корм ПК 1203 согласно ГОСТ Р5025892. Перед началом лабораторных экспериментов для акклиматизации подопытные животных выдерживались в течение 5дн.Оценку острой токсичности осуществляли на клинически здоровых беспородных белых мышах с начальной массой тела 20–25г (возраст 2,53,0мес) путем однократного применения штаммов и кормовой добавки. Наблюдение проводили в течение 14дн с учетом изменения общего состояния, а также поведения подопытных лабораторных мышей.Для изучения хронической токсичности исследуемой кормовой добавки использовали клинически здоровых белых мышей и цыплятбройлеров. За общим состоянием организма лабораторных объектов вели постоянное наблюдение, обращая внимание на следующие показатели: сохранность, внешний вид, поведение, потребление корма, изменение массы тела, морфобиохимические показатели крови.Патоморфологические исследования тканей и органов были проведены на нелинейных белых мышах, использованных в опыте по изучению хронической токсичности. Гистологическому исследованию были подвергнуты: легкие, желудок, тонкий и толстый кишечник, печень, почки, надпочечники, сердце, селезенка, поджелудочная железа, тимус, щитовидная железа. Фиксацию материала для гистологического исследования осуществляли в 10%м растворе нейтрального формалина и резали на замораживающем микротоме. Окраску тканей проводили гематоксилинэозином.Обсуждение результатов. Препаративныеформы компонентов кормовой добавки мышам вводили после 12часовой голодной выдержки однократно с использованием металлического зонда, в качестве которого использовали обрезанную и отшлифованную с напаем олова инъекционную иглу. В контрольной группе использовался физиологический раствор. После введения испытуемых составов за животными проводили наблюдение в течение 14 дн, учитывая при этом изменения их общего состояния и поведения (таблица 1).
Таблица 1
Результаты проверки острой токсичности штаммов, входящих в состав кормовой добавки, на белых мышахГруппаКолво мышей, гол.Объемжидкости, млКолвовведенныхмикробныхклетокРезультат испытаний, гол.заболелопаловыжилоКонтрольная101–0010Bacillussubtilis1я опытная1014,3×10700102я опытная1018,6×10700103я опытная1012,0×1080010Lactobacillus acidophilus4я опытная1014,3×10700105я опытная1018,6×10700106я опытная1012,0×1080010Ruminococcus albus 7я опытная1014,3×10700108я опытная1018,6×10700109я опытная1012,0×1080010Жидкая комплексная пробиотикоферментная кормовая добавка10я опытная1014,3×107001011я опытная1018,6×107001012я опытная1012,0×1080010
Исследования показали, что у животных опытных и контрольной групп на протяжении всего периода наблюдения вне зависимости от дозы ввода изучаемых составов не заболело и не пало ни одной мыши. Кроме того, не регистрировались существенные отклонения от нормыповедения, в общем состоянии и аппетите. Они были подвижными и активными, хорошо поедали корм, сохраняя все рефлексы. Это позволило заключить, что бактериальные компоненты кормовой добавки и готовая кормовая добавка в исследуемых концентрациях не вызывают выраженного токсикоза и поэтому могут считаться малотоксичными.Исследования по определению хронической токсичности проводили на14суточных нелинейных белых мышах и цыплятахбройлерах путем перорального введения с кормом жидкой формы комплексной кормовой добавки (таблица 2). Таблица 2Результаты проверкикормовой добавки на хроническую токсичностьГруппаДозировка, кл./сутКолвоголовРезультат испытаний, гол.заболелопаловыжилоБелые мышиКонтрольная–1000101я опытная1,3×1081000102я опытная6,0×1081000103я опытная2,6×108100010ЦыплятабройлерыКонтрольная–1000101я опытная1,3×1081000102я опытная6,0×1081000103я опытная2,6×108100010
Препарат задавали один раз в день в течение 30 сут с последующим наблюдением за животными в течение 7сут. Так как LD50в опыте по определению острой токсичности нами не установлена, то в качестве ежедневной дозы применяли трехкратно увеличенные дозы 1,3×108; 6,0×108; 2,6×108кл./сут. В результате 30дневного скармливания исследуемых суспензий было установлено, что мыши и цыплятабройлеры всех опытных групп оставались клинически здоровыми на протяжении всего периода наблюдения и не гибли (таблица 2).Исследования показали, что длительное скармливание кормовой добавки мышам и цыплятамбройлерам не привело к развитию токсикоза. На всем протяжении опыта общее состояние как опытных, так и контрольных животных и птицы было хорошим, аппетит сохранен. Установлено, что на конец опыта в группах, получавших добавку, живая масса мышей был достоверно (Р < 0,05) выше, чем в контроле, на 12,8–14,2%, при 100%й сохранности поголовья во всех группах. Вес 30суточных цыплятбройлеров был достоверно (Р < 0,05) выше в опытных группах, где суточный прирост составил в среднем 39,8г, что выше контрольного значения на 13,7%. Гибель птицы не зафиксирована во всех группах, а затраты корма были ниже вгруппах, потреблявших комплексную кормовую добавку(таблица 3).Таблица 3
Влияние кормовой добавки на рост и развитие животных и птицыПоказательГруппаконтрольная1я опытная2я опытная1я опытнаяБелые мышиМасса тела, г
в начале опыта6,05±0,316,11±0,226,14±0,316,09±0,22в конце опыта17,50±0,8619,87±0,91*19,75±0,89*19,99±0,74*Прирост за опыт
г11,4513,7613,6113,90% к контролю100120,2118,9121,4ЦыплятабройлерыМасса тела, г
в начале опыта37,6±1,937,9±1,837,5±1,537,8±1,6в конце опыта1087,6±52,41234,9±61,2*1231,5±60,6*1228,8±61,4*Суточный прирост за 30 сут, г35,039,939,839,7Затраты корма на 1кг приростаживой массы, кг2,132,092,102,08Примечание: * Р < 0,05.
В конце эксперимента проведен отбор крови и изучен ее морфологический состав и биохимические показатели сыворотки (таблица 4).Таблица 4Морфологический состав крови и биохимические показатели сыворотки крови белых мышей и цыплятбройлеровПоказательГруппаконтрольная1я опытная2я опытная3я опытнаяБелые мышиЭритроциты, 1012/л8,8±0,79,7±0,310,1±0,3*9,2±0,3Тромбоциты, 109/л271,2±11,1328,1±18,8*354,1±18,8*296,1±18,8Лейкоциты, 109/л8,3±0,79,8±0,58,4±0,510,8±0,5*Гемоглобин, г/л142,8±5,2159,7±4,8*141,2±4,8163,6±4,6*Общий белок, г/л53,7±2,652,6±2,858,4±2,864,2±2,8Мочевина, мМ/л20,28±0,9619,06±0,8620,66±0,8919,79±0,89Холестерин, мМ/л3,59±0,163,31±0,173,42±0,173,18±0,16ЩФ, ед./л65,4±3,248,9±2,3*52,4±2,3*50,8±2,3*Кальций, мМ/л2,15±0,102,30±0,122,35±0,132,45±0,12Фосфор неорг., мМ/л1,62±0,131,77±0,131,82±0,121,85±0,13ЦыплятабройлерыЭритроциты, 1012/л2,6±0,13,4±0,2*3,2±0,25*2,9±0,2*Тромбоциты, 109/л77,2±2,454,2±2,7*77,1±3,472,9±3,4
Лейкоциты, 109/л35,1±1,630,2±1,5*31,6±1,7*33,3±1,6Гемоглобин, г/л87,44,196,54,8103,15,0*98,84,9*Общийбелок, г/л47,2±2,246,5±2,350,6±2,447,2±2,1Мочевина, мМ/л3,060,132,710,142,710,08*2,730,09Холестерин, мМ/л3,440,173,160,162,990,14*3,050,13ЩФ, ед./л1137,343,8932,745,5*965,242,6*887,441,8*Кальций, мМ/л2,790,142,760,152,840,132,900,14Фосфор неорг., мМ/л2,130,112,150,102,170,092,270,12Примечание: * Р < 0,05.
Потребление опытной кормовой добавки мышами в течение 30дн не привело кзначительным изменениям в морфологическом составе крови, так как показатели находились в пределах физиологических норм. Однако в опытных группах в сравнении с контролем зафиксировано увеличение количества эритроцитов (на 11,5%) и тромбоцитов (в среднем на 20,2%), а концентрация гемоглобина возросла в среднем на 8,2%. В сыворотке крови мышей нами отмечено снижение концентрации холестерина на 11,4% и активности щелочной фосфатазы –в среднем на 22,5% (Р < 0,05), при этом существенных изменений остальных изученных биохимических показателей при скармливании животным исследуемой добавки не наблюдалось.Использование добавки в корме цыплятбройлеров приводило к изменению в пределах физиологических нормколичества форменных элементов крови: достоверно (Р < 0,05) увеличивало количество эритроцитов (в среднем на 18,6%), снижало количество лейкоцитов (в среднем на 9,6%) в сравнении с контролем. В сыворотке крови цыплят опытных групп зафиксировано снижение активности ЩФ, концентрации холестерина, мочевины, однако изменения этих показателей не выходили за пределы норм.При проведении патоморфологических исследований у нелинейных белых мышей, находившихся в хроническом опыте, в опытных группах, где вводили кормовуюдобавку, не было выявлено отклонений от нормы. Расположение внутренних органов было правильным, жидкости в плевральной и брюшной полостях не обнаружено. Просвет трахей и бронхов свободен, ткань легких розового цвета. Слизистая оболочка кишечника и желудка серорозового цвета без изъязвлений и кровоизлияний. Корковое и мозговое вещество почек на разрезе хорошо различимы, надпочечники без изменений.Гистологические исследования белых мышей, получавших комплексную кормовую добавку,проводили в группе с максимальной концентрацией исследуемой добавки. Результаты описаны ниже.Легкие –умеренное полнокровие; просветы альвеол и мелких бронхов свободны; в просвете бронхов скопления лейкоцитов; встречаются свежие кровоизлияния в результате декапитации.Желудок –покровный эпителий сохранен; цитоморфология главных и обкладочных желез позволяет говорить об отсутствии в них дистрофических процессов и о нормальной кислотообразующей функции.Тонкий и толстый кишечник –в ворсинках тонкого кишечника в отдельных случаях отмечается десквамация покровного эпителия; оттека, полнокровия усиления лимфогистиоцитарной инфильтрации нет; стенка толстого кишечника без особенностей, имеет обычное гистологическое строение.Печень –балочный рисунок хорошо выражен; цитоплазма гепатоцитов зернистая и эозинофильная; активации и пролиферации клеток ретикулоэндотелиальной системы не наблюдается.
Почки –клубочковыйаппарат без особенностей; капсула Шумлянского–Боумена свободна; в нефроцитах дистрофических изменений не отмечается; впросвете канальцев количество белковых масс не увеличено.Надпочечники –дистрофических изменений не наблюдается; капсула тонкая; подкапсулярная бластема не определяется; пучковость выражена хорошо; мозговое вещество без особенностей.Сердце –миокард представлен правильно ориентированными пучками волокон; дистрофии, атрофии, фрагментации, деформации кардиомиоцитов не наблюдалось.Селезенка –полнокровие красной пульпы; границы фолликулов четкие; выражены центры пролиферации; пульпа богата клеточными элементами.Поджелудочная железа –патологических изменений в строение эндои экзокринного аппарата железы не наблюдается.Тимус –имеет дольчатое строение; корковое и мозговое вещество хорошо дифференцируются; снижения плотности лимфоцитов в корковом веществе не наблюдается.Щитовидная железа –полнокровие, фолликулы полиморфны; коллоид светлый, пенистый; много мелких фолликулов, лишенных просвета; эпителий кубический, в отдельных фолликулах гиперплазирован, многорядный.Таким образом, исследования токсичности комплексной кормовой добавки на белых мышах и цыплятахбройлерах, а также оценка некоторых морфобиохимических показателей кровии патологоанатомических исследований не показали токсического действия препарата на организм экспериментальных животных.Вывод. Разработаннаяжидкая трехштаммовая комплексная кормовая добавка, проявляющая пробиотические и ферментативные свойства, согласно токсикологическим исследованиям безопасна для использования и может применятся в промышленном птицеводстве.
Ссылки на источники1.ПетенкоА.И. Повышение биологического потенциала перепелокнесушек при использовании пробиотических кормовых добавок / А.И.Петенко, Ю.А.Лысенко // Ветеринария Кубани. 2012. №5. С.57.2.Перспективы использования микробиологических препаратов / И.В.Щукина, А.В.Степовой, В.В.Борисенко, В.И.Николаенко // Молодой ученый. 2015. №51(85). С.2528.3.Пробиотическая кормовая добавка с антибиотическими свойствами для птицеводства / С.А.Волкова, А.В.Степовой, В.В.Борисенко, В.И.Николаенко // Молодой ученый. 2015. №51(85). С. 46.
Лысенко Юрий Андреевич,к.б.н, доцент, ФГБОУ ВПО «Кубанский государственный аграрный университет»,Краснодарyuraduban45@mail.ru
Изучение токсикофармакологическихсвойств
комплексной пробиотикоферментной кормовой добавки для птицеводства
Аннотация.Вработе представлены результаты изучения токсикологических свойств жидкой комплексной пробиотикоферментной кормовой добавки, состоящей из штаммов Lactobacillusacidophilus, Bacillussubtilisи Ruminococcusalbusна цыплятахбройлерах и нелинейных белых лабораторных мышах путем изучения острой и хронической её токсичности.Ключевые слова:кормовая добавка, острая токсичность, хроническая токсичность, мыши, цыплятабройлеры, морфология крови, биохимия крови, поведение.
Решение главной народнохозяйственной проблемы –обеспечение населения продуктами питания –напрямую связано с развитием животноводства, в частности птицеводства. Всвязи сэтим важной целью государственной аграрной политики страны вперспективе до 2020г. является эффективное импортозамещение на отечественном рынке птицеводческой продукции. Потребление мяса будет практически полностью удовлетворяться за счет отечественного производителя. Это требует внедрения инновационных технологий в содержание и питание сельскохозяйственнойптицы[1].В условиях ведения интенсивного промышленного птицеводства возникает высокая вероятность развития в хозяйствах условнопатогенных и патогенных микроорганизмов. Это требует систематического применения антибиотиков и химиотерапевтических препаратов, приводящее к повышению антибиотикорезистентности некоторых патогенных штаммов и широкому распространению желудочнокишечных заболеваний, которые являются основной причиной гибели молодняка[1].Предотвратить развитие многих патологий позволяет использование кормов, обогащенных биологически активными пробиотическими добавками –стабилизированными культурами микроорганизмов и продуктов их ферментации, обладающие свойством оптимизировать кишечные микробиоценозы, подавлять рост и развитие патогенной и условнопатогенной микрофлоры, повышать обменные процессы и защитные реакции организма, активизируя клеточный и гуморальный иммунитет[2].В настоящее время на рынке пробиотиков востребованы поликомпонентные препараты, состоящие из нескольких штаммов бактерий или включающие добавки, усиливающие действие микроорганизмов, повышающие перевариваемость и усвояемость кормов, стимулирующих рост и развитие животных. Современный подход в разработке пробиотических препаратов и добавок подразумевает применение различных видов микроорганизмов в определенных сочетаниях. Спектр микроорганизмов, используемых для полученияпробиотиков, достаточно широк[3].
Разработка и внедрение новых биотехнологических препаратов и добавок, альтернативных кормовым антибиотикам, является актуальной в решении важной народнохозяйственной проблемы обеспечения населения России экологически безопасной продукцией птицеводства.Целью данной работы являлось изучение токсикологических свойств комплексной пробиотикоферментной кормовой добавкидля использования в птицеводстве.Работа проведена при поддержке Фонда содействия развитию малым формам предприятий в научнотехнической сфере.Материалы иметоды исследований.Токсикологическая оценка штаммов Lactobacillusacidophilus, BacillussubtilisиRuminococcusalbus, а также их совместное использование вкормовой добавкипроводилась на цыплятахбройлерах и нелинейных белых лабораторных мышах по средствам изучения острой и хронической токсичностисогласно ГОСТРИСО 10993112009.Все лабораторные животные находились в стандартных условиях вивария, имели свободный доступ к воде, нормальный температурный и световой режимы, содержались в клетках с древесной стружкой в качестве подстилки и получали лабораторный гранулированный корм ПК 1203 согласно ГОСТ Р5025892. Перед началом лабораторных экспериментов для акклиматизации подопытные животных выдерживались в течение 5дн.Оценку острой токсичности осуществляли на клинически здоровых беспородных белых мышах с начальной массой тела 20–25г (возраст 2,53,0мес) путем однократного применения штаммов и кормовой добавки. Наблюдение проводили в течение 14дн с учетом изменения общего состояния, а также поведения подопытных лабораторных мышей.Для изучения хронической токсичности исследуемой кормовой добавки использовали клинически здоровых белых мышей и цыплятбройлеров. За общим состоянием организма лабораторных объектов вели постоянное наблюдение, обращая внимание на следующие показатели: сохранность, внешний вид, поведение, потребление корма, изменение массы тела, морфобиохимические показатели крови.Патоморфологические исследования тканей и органов были проведены на нелинейных белых мышах, использованных в опыте по изучению хронической токсичности. Гистологическому исследованию были подвергнуты: легкие, желудок, тонкий и толстый кишечник, печень, почки, надпочечники, сердце, селезенка, поджелудочная железа, тимус, щитовидная железа. Фиксацию материала для гистологического исследования осуществляли в 10%м растворе нейтрального формалина и резали на замораживающем микротоме. Окраску тканей проводили гематоксилинэозином.Обсуждение результатов. Препаративныеформы компонентов кормовой добавки мышам вводили после 12часовой голодной выдержки однократно с использованием металлического зонда, в качестве которого использовали обрезанную и отшлифованную с напаем олова инъекционную иглу. В контрольной группе использовался физиологический раствор. После введения испытуемых составов за животными проводили наблюдение в течение 14 дн, учитывая при этом изменения их общего состояния и поведения (таблица 1).
Таблица 1
Результаты проверки острой токсичности штаммов, входящих в состав кормовой добавки, на белых мышахГруппаКолво мышей, гол.Объемжидкости, млКолвовведенныхмикробныхклетокРезультат испытаний, гол.заболелопаловыжилоКонтрольная101–0010Bacillussubtilis1я опытная1014,3×10700102я опытная1018,6×10700103я опытная1012,0×1080010Lactobacillus acidophilus4я опытная1014,3×10700105я опытная1018,6×10700106я опытная1012,0×1080010Ruminococcus albus 7я опытная1014,3×10700108я опытная1018,6×10700109я опытная1012,0×1080010Жидкая комплексная пробиотикоферментная кормовая добавка10я опытная1014,3×107001011я опытная1018,6×107001012я опытная1012,0×1080010
Исследования показали, что у животных опытных и контрольной групп на протяжении всего периода наблюдения вне зависимости от дозы ввода изучаемых составов не заболело и не пало ни одной мыши. Кроме того, не регистрировались существенные отклонения от нормыповедения, в общем состоянии и аппетите. Они были подвижными и активными, хорошо поедали корм, сохраняя все рефлексы. Это позволило заключить, что бактериальные компоненты кормовой добавки и готовая кормовая добавка в исследуемых концентрациях не вызывают выраженного токсикоза и поэтому могут считаться малотоксичными.Исследования по определению хронической токсичности проводили на14суточных нелинейных белых мышах и цыплятахбройлерах путем перорального введения с кормом жидкой формы комплексной кормовой добавки (таблица 2). Таблица 2Результаты проверкикормовой добавки на хроническую токсичностьГруппаДозировка, кл./сутКолвоголовРезультат испытаний, гол.заболелопаловыжилоБелые мышиКонтрольная–1000101я опытная1,3×1081000102я опытная6,0×1081000103я опытная2,6×108100010ЦыплятабройлерыКонтрольная–1000101я опытная1,3×1081000102я опытная6,0×1081000103я опытная2,6×108100010
Препарат задавали один раз в день в течение 30 сут с последующим наблюдением за животными в течение 7сут. Так как LD50в опыте по определению острой токсичности нами не установлена, то в качестве ежедневной дозы применяли трехкратно увеличенные дозы 1,3×108; 6,0×108; 2,6×108кл./сут. В результате 30дневного скармливания исследуемых суспензий было установлено, что мыши и цыплятабройлеры всех опытных групп оставались клинически здоровыми на протяжении всего периода наблюдения и не гибли (таблица 2).Исследования показали, что длительное скармливание кормовой добавки мышам и цыплятамбройлерам не привело к развитию токсикоза. На всем протяжении опыта общее состояние как опытных, так и контрольных животных и птицы было хорошим, аппетит сохранен. Установлено, что на конец опыта в группах, получавших добавку, живая масса мышей был достоверно (Р < 0,05) выше, чем в контроле, на 12,8–14,2%, при 100%й сохранности поголовья во всех группах. Вес 30суточных цыплятбройлеров был достоверно (Р < 0,05) выше в опытных группах, где суточный прирост составил в среднем 39,8г, что выше контрольного значения на 13,7%. Гибель птицы не зафиксирована во всех группах, а затраты корма были ниже вгруппах, потреблявших комплексную кормовую добавку(таблица 3).Таблица 3
Влияние кормовой добавки на рост и развитие животных и птицыПоказательГруппаконтрольная1я опытная2я опытная1я опытнаяБелые мышиМасса тела, г
в начале опыта6,05±0,316,11±0,226,14±0,316,09±0,22в конце опыта17,50±0,8619,87±0,91*19,75±0,89*19,99±0,74*Прирост за опыт
г11,4513,7613,6113,90% к контролю100120,2118,9121,4ЦыплятабройлерыМасса тела, г
в начале опыта37,6±1,937,9±1,837,5±1,537,8±1,6в конце опыта1087,6±52,41234,9±61,2*1231,5±60,6*1228,8±61,4*Суточный прирост за 30 сут, г35,039,939,839,7Затраты корма на 1кг приростаживой массы, кг2,132,092,102,08Примечание: * Р < 0,05.
В конце эксперимента проведен отбор крови и изучен ее морфологический состав и биохимические показатели сыворотки (таблица 4).Таблица 4Морфологический состав крови и биохимические показатели сыворотки крови белых мышей и цыплятбройлеровПоказательГруппаконтрольная1я опытная2я опытная3я опытнаяБелые мышиЭритроциты, 1012/л8,8±0,79,7±0,310,1±0,3*9,2±0,3Тромбоциты, 109/л271,2±11,1328,1±18,8*354,1±18,8*296,1±18,8Лейкоциты, 109/л8,3±0,79,8±0,58,4±0,510,8±0,5*Гемоглобин, г/л142,8±5,2159,7±4,8*141,2±4,8163,6±4,6*Общий белок, г/л53,7±2,652,6±2,858,4±2,864,2±2,8Мочевина, мМ/л20,28±0,9619,06±0,8620,66±0,8919,79±0,89Холестерин, мМ/л3,59±0,163,31±0,173,42±0,173,18±0,16ЩФ, ед./л65,4±3,248,9±2,3*52,4±2,3*50,8±2,3*Кальций, мМ/л2,15±0,102,30±0,122,35±0,132,45±0,12Фосфор неорг., мМ/л1,62±0,131,77±0,131,82±0,121,85±0,13ЦыплятабройлерыЭритроциты, 1012/л2,6±0,13,4±0,2*3,2±0,25*2,9±0,2*Тромбоциты, 109/л77,2±2,454,2±2,7*77,1±3,472,9±3,4
Лейкоциты, 109/л35,1±1,630,2±1,5*31,6±1,7*33,3±1,6Гемоглобин, г/л87,44,196,54,8103,15,0*98,84,9*Общийбелок, г/л47,2±2,246,5±2,350,6±2,447,2±2,1Мочевина, мМ/л3,060,132,710,142,710,08*2,730,09Холестерин, мМ/л3,440,173,160,162,990,14*3,050,13ЩФ, ед./л1137,343,8932,745,5*965,242,6*887,441,8*Кальций, мМ/л2,790,142,760,152,840,132,900,14Фосфор неорг., мМ/л2,130,112,150,102,170,092,270,12Примечание: * Р < 0,05.
Потребление опытной кормовой добавки мышами в течение 30дн не привело кзначительным изменениям в морфологическом составе крови, так как показатели находились в пределах физиологических норм. Однако в опытных группах в сравнении с контролем зафиксировано увеличение количества эритроцитов (на 11,5%) и тромбоцитов (в среднем на 20,2%), а концентрация гемоглобина возросла в среднем на 8,2%. В сыворотке крови мышей нами отмечено снижение концентрации холестерина на 11,4% и активности щелочной фосфатазы –в среднем на 22,5% (Р < 0,05), при этом существенных изменений остальных изученных биохимических показателей при скармливании животным исследуемой добавки не наблюдалось.Использование добавки в корме цыплятбройлеров приводило к изменению в пределах физиологических нормколичества форменных элементов крови: достоверно (Р < 0,05) увеличивало количество эритроцитов (в среднем на 18,6%), снижало количество лейкоцитов (в среднем на 9,6%) в сравнении с контролем. В сыворотке крови цыплят опытных групп зафиксировано снижение активности ЩФ, концентрации холестерина, мочевины, однако изменения этих показателей не выходили за пределы норм.При проведении патоморфологических исследований у нелинейных белых мышей, находившихся в хроническом опыте, в опытных группах, где вводили кормовуюдобавку, не было выявлено отклонений от нормы. Расположение внутренних органов было правильным, жидкости в плевральной и брюшной полостях не обнаружено. Просвет трахей и бронхов свободен, ткань легких розового цвета. Слизистая оболочка кишечника и желудка серорозового цвета без изъязвлений и кровоизлияний. Корковое и мозговое вещество почек на разрезе хорошо различимы, надпочечники без изменений.Гистологические исследования белых мышей, получавших комплексную кормовую добавку,проводили в группе с максимальной концентрацией исследуемой добавки. Результаты описаны ниже.Легкие –умеренное полнокровие; просветы альвеол и мелких бронхов свободны; в просвете бронхов скопления лейкоцитов; встречаются свежие кровоизлияния в результате декапитации.Желудок –покровный эпителий сохранен; цитоморфология главных и обкладочных желез позволяет говорить об отсутствии в них дистрофических процессов и о нормальной кислотообразующей функции.Тонкий и толстый кишечник –в ворсинках тонкого кишечника в отдельных случаях отмечается десквамация покровного эпителия; оттека, полнокровия усиления лимфогистиоцитарной инфильтрации нет; стенка толстого кишечника без особенностей, имеет обычное гистологическое строение.Печень –балочный рисунок хорошо выражен; цитоплазма гепатоцитов зернистая и эозинофильная; активации и пролиферации клеток ретикулоэндотелиальной системы не наблюдается.
Почки –клубочковыйаппарат без особенностей; капсула Шумлянского–Боумена свободна; в нефроцитах дистрофических изменений не отмечается; впросвете канальцев количество белковых масс не увеличено.Надпочечники –дистрофических изменений не наблюдается; капсула тонкая; подкапсулярная бластема не определяется; пучковость выражена хорошо; мозговое вещество без особенностей.Сердце –миокард представлен правильно ориентированными пучками волокон; дистрофии, атрофии, фрагментации, деформации кардиомиоцитов не наблюдалось.Селезенка –полнокровие красной пульпы; границы фолликулов четкие; выражены центры пролиферации; пульпа богата клеточными элементами.Поджелудочная железа –патологических изменений в строение эндои экзокринного аппарата железы не наблюдается.Тимус –имеет дольчатое строение; корковое и мозговое вещество хорошо дифференцируются; снижения плотности лимфоцитов в корковом веществе не наблюдается.Щитовидная железа –полнокровие, фолликулы полиморфны; коллоид светлый, пенистый; много мелких фолликулов, лишенных просвета; эпителий кубический, в отдельных фолликулах гиперплазирован, многорядный.Таким образом, исследования токсичности комплексной кормовой добавки на белых мышах и цыплятахбройлерах, а также оценка некоторых морфобиохимических показателей кровии патологоанатомических исследований не показали токсического действия препарата на организм экспериментальных животных.Вывод. Разработаннаяжидкая трехштаммовая комплексная кормовая добавка, проявляющая пробиотические и ферментативные свойства, согласно токсикологическим исследованиям безопасна для использования и может применятся в промышленном птицеводстве.
Ссылки на источники1.ПетенкоА.И. Повышение биологического потенциала перепелокнесушек при использовании пробиотических кормовых добавок / А.И.Петенко, Ю.А.Лысенко // Ветеринария Кубани. 2012. №5. С.57.2.Перспективы использования микробиологических препаратов / И.В.Щукина, А.В.Степовой, В.В.Борисенко, В.И.Николаенко // Молодой ученый. 2015. №51(85). С.2528.3.Пробиотическая кормовая добавка с антибиотическими свойствами для птицеводства / С.А.Волкова, А.В.Степовой, В.В.Борисенко, В.И.Николаенко // Молодой ученый. 2015. №51(85). С. 46.
