Эффективность применения пробиотических средств фирмы Chrisal для профилактики заболеваний вымени коров при промышленных технологиях содержания
ART 85001
Авторы:
О.
Г. Петрова, М.
И. Барашкин
О.
Г. Петрова, М.
И. Барашкин Библиографическое описание статьи для цитирования:
Петрова
О.
Г.,
Барашкин
М.
И. Эффективность применения пробиотических средств фирмы Chrisal для профилактики заболеваний вымени коров при промышленных технологиях содержания // Научно-методический электронный журнал «Концепт». –
2015. – Т. 13. – С.
1–5. – URL:
http://e-koncept.ru/2015/85001.htm.
Аннотация. В последнее время значительно вырос уровень использования антибиотиков, в том числе последних поколений, отмечается ускорение эволюции микроорганизмов и выработка у них устойчивости к воздействию лекарственных препаратов. Также у высокопродуктивных коров отмечаются широко распространенные дисфункции иммунитета, проявляющиеся увеличением заболеваемости. Таким образом, важным являлось установить видовой состав микрофлоры, присутствующей на молочно-товарных фермах Свердловской области и изучить эффективность применения пробиотических препаратов.
Текст статьи
Петрова Ольга Григорьевна,доктор ветеринарных наук,профессор,ФГБОУ ВПО «Уральский государственный аграрный университет»,г.Екатеринбургsuper.kafedra2013@ yandex.ru
Барашкин Михаил Иванович,кандидат ветеринарных наук, декан,ФГБОУ ВПО«Уральский государственный аграрный университет»,г.Екатеринбургdecanatvet@mail.ru
Эффективность применения пробиотических средств фирмы Chrisal
для профилактики заболеваний вымени коровпри промышленных технологиях содержания
Аннотация. В последнее время значительно вырос уровень использования антибиотиков, в том числе последних поколений, отмечается ускорение эволюции микроорганизмов и выработка у них устойчивости к воздействию лекарственных препаратов. Также у высокопродуктивных коров отмечаются широко распространенные дисфункции иммунитета, проявляющиеся увеличением заболеваемости. Таким образом, важным являлось установить видовой состав микрофлоры, присутствующей на молочнотоварных фермах Свердловской области и изучить эффективность применения пробиотических препаратов.Ключевые слова:пробиотические препараты, маститы, микрофлора, вымя,спектр микроорганизмов.
Заболевание маститом наиболее часто вызывают такие бактерии как Streptococcusagalactiae; Streptococcusuberis; Streptococcusdysgalacticae; Staphylococcusaureus,которые являются грамположительными кокками. Эти микроорганизмы хорошо адаптировались к росту в молоке и выделяют ферменты, вызывающие свертывание молока и распад гликопротеидов.Кроме них встречаются колиформы, в том числе Escherichiacoli, которая входит в эту группу. К этой группе относятся также Enterobacter, Klebsiella, Citrobacterи другие бактерии. Мастит, вызванный этими возбудителями, составляет 15% от всех случаев заболевания и чаще приводит развитию тяжелых форм клинического мастита, чем стрептококковые или стафилококковые инфекции. Также из секрета молочной железы могут выделяться микоплазмы, вирусы, грибы [1].Определение состава микрофлоры в ФГУП «Учхоз «Уралец» в 2014году проводили на базе МБУ «Клиникодиагностический центр». Для бактериологического исследования в стерильные пробирки с питательной средой брали смывы с поверхности рук доярки, внутренней поверхности доильных стаканов во время доения коров, пробы остаточного молока и патологического секрета молочной железы. Всего былоисследовано 40 проб. В лаборатории микробиологии проводили посев на питательные среды с определением чувствительности к антибиотикам. Изучение микробного фона на молочнотоварной ферме учхоза «Уралец» показало наличие таких патогенных микроорганизмов какStreptococcusagalactiae, Escherichiacoli, Pseudomonasaeruginosa, Klebsiellapneumonia(табл. 1). Проведенное исследование показало наличие на поверхности вымени в 5% проб Pseudomonasaeruginosa, в 40% проб идентифицировалась Escherichiacoli, в том числе в 25% проб в ассоциации с Klebsiellapneumonia. В секрете молочной железы были выявлены такие патологические микроорганизмы как Streptococcusagalactiaeи Escherichiacoli, приэтом Streptococcusagalactiaeбыл высеян в 30% проб, а Escherichiacoli–в5% проб.
Таблица 1Видовой состав микрофлоры на поверхности вымени и в секрете
ПробыВид микроорганизмовPseudomonasaeruginosaEscherichiacoliStreptococcusagalactiaeKlebsiellapneumoniaСмывы с поверхности вымени++
+Секрет вымени
++
Исследования видового состава микроорганизмов секрета молочной железы в ряде сельхозпредприятий и у животных принадлежащих частным владельцам Ирбитского района Свердловской области проводили в 201314годах на базе ГУБСО «Ирбитская зональная ветеринарная лаборатория».Из 74 исследованных проб секрета вымени культуры микроорганизмов были выявлены в 56 пробах. Из числа выделенных культур доминирующим был Staphilococccusaureus, он был обнаружен в 38 пробах. Из 10 исследованных проб выделены культуры Esсheriсhiacoli, из 8 проб –микроскопические грибы рода Candida(таблица 2). В 18 пробах возбудитель выявлен не был, что возможно связано с селективными особенностями сред.
Таблица 2Спектр микроорганизмов, выделенных от больных маститом коров
Возбудитель маститаПроб с положительным результатом, %Чувствительность к противомикробному средствуStaphilococccus aureus51,35НеомицинEscherichia coli13,51ЭнроксилCandida10,81Клотримазол
Спектр выделенных микроорганизмов из проб, взятых в разных сельхозпредприятиях Свердловской области, отличался. В колхозе «Урал» во всех 30 пробах был обнаружен Staphylococcusaureus, СПК «Килачевский» золотистый стафилококк выделен из 40% проб, в агрофирме «Ирбитская» –в 15% проб. Кроме того, в последнем хозяйстве из 40% исследованных проб секрета выделены микроскопические грибы рода Candida. Кишечная палочка была выделена из 71,4% проб секрета вымени коров, принадлежащих частным владельцам.Сравнение полученных результатов с данными предыдущих лет показывает, что в настоящее время в высокопродуктивных стадах Свердловской области снижается количество маститов стрептококковой этиологии, увеличивается стафилококковой. Кроме того, увеличивается количество маститов грибковой этиологии, чему способствует широкое использование антибиотиков[2].Таким образом, применение антибиотиков и антисептиков отрицательно повлияло на микробиоценоз молочной железы коров, что показывает необходимость разработки методов их коррекции.Альтернативой использования дезинфицирующих средств и антибиотиков является применение средств на основе пробиотиков как для обработки вымени после доения, так и для аэрозольной обработки животноводческих помещений для создания в них благоприятного микроклимата [3, 4]. В основе действия микробиологических препаратов для обработки вымени коров, лежат антагонистические взаимоотношения между патогенными микроорганизмами и культурами пробиотиков, входящими в состав применяемых препаратов.Изучение влияния комплекса пробиотических препаратов на состояние молочной железы и сосков вымени коров проводили в 2014г. на базе МТФ учхоза «Уралец». В наших исследованиях были использованы средства фирмы Chrisal(Бельгия), содержащие пробиотики: PipPlusWater(PIP PW) –для обработкиводы и кормов, PipCowTeatCleaner(PIP CTC) –дляобработки вымени коров и PipAnimalHousingStabilizer(PIPAHS) –для санации стойл и мест пребывания животных.В основе биопрепаратов лежит ассоциация штаммов аэробных строго сапрофитных микроорганизмов: Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus pumilus и Bacillus megaterium. Данные комплексные концентрированные микробиологические продукты с одной стороны активно воздействуют на патогенную микрофлору и частицы грязи, а с другой стороны формируют полезную для здоровья и безопасную микрофлору. Также с состав продуктов входят ферменты и энзимы, которые обеспечивают очищение поверхностей от механических загрязнений[5,6].Научнопроизводственный опыт проведен на двух группах лактирующих коров, в опытную группу входило 148 голов, в контрольную –149.Животные содержались в разных корпусах, продолжительность опыта составляла 1 месяц.Для создания благоприятного микроклимата в корпусе проводили аэрозольную обработку стен, настила, бетонных полов, животных, средством PIPAHS из расчета 1 литр концентратана 300 м2площади. Средство распыляли с использованием пульверизатора объёмом 5 л со шлангом в присутствии животных. В течение первых 7 дней обработку производили ежедневно, затем –1раз в 3 дня .Для орошения кормов и обмывания вымени перед доением использовали средство PIPPWв концентрации 0,5%, а для опрыскивания внутренней поверхности доильных стаканов после доения –в концентрации 5%. Обработку кормов проводили 1 раз сутки, доильных стаканов –после окончания каждой дойки. Обмывание вымени раствором PIPPWпроводили из отдельной ёмкости объемом 1 литр с использованием салфетки из нетканого материала непосредственно после механической и влажной очистки вымени водопроводной водой перед доением. Для орошения сосков после доения применяли средство PIPСТС, которое наносили при помощи пульверизатора непосредственно после снятия доильного аппарата, распыляя препарат снизу вверх от верхушки соска в течение 23 секунд. В течение первой недели использовали средство в концентрации 7%, в течение второй недели –5%, затем концентрацию снизили до 3%. В контрольной группе содержание и уход осуществлялись по используемой в хозяйстве технологии. За время проведения эксперимента дезинфекция корпуса не проводилась. Соски вымени после доения обрабатывали йодсодержащим препаратом Dipal, который наносили на соски после снятия доильного аппарата методом погружения их в специальный стаканчик. Перед началом опыта по применению пробиотических препаратов провели исследование всех коров на скрытый мастит с помощью быстрого маститного теста. Повторное исследование на скрытый мастит проводили в конце опытного периода. Изучение влияния комплекса пробиотических препаратов на воспалительные заболевания вымени коров показало, что после его применения произошло снижение количества голов, имеющих воспаление в одной или нескольких четвертях вымени с 42,6% до 36,5% (таблица. 3). При этом на 35,0% сократилось количество коров, имеющих клинически выраженный мастит, с 17 до 11 голов.
Таблица 3Заболеваемость коров маститами при применении комплекса пробиотических средств
Форма маститаНачало опытаОкончание опытаОпытная группаКонтрольная группаОпытная группаКонтрольная группаСубклинический мастит, %24,335,522,331,5Клинический мастит, %11,53,47,42,0
При исследовании намастит количество пораженных четвертей уменьшилось по сравнению с исходными данными на 17,5%, с 80 до 66 четвертей, при этом количество скрытых маститов сократилось на 11,3%, с 62 до 55 четвертей (рисунок 1).
Рис.1. Изменение уровня пораженных четвертей вымени на фоне применения пробиотических препаратов
В контрольной группе при исследовании на мастит в конце опытного периода отмечено снижение количества голов, имеющих одну или более пораженную четверть, однако общее количество четвертей, имеющих воспалительных процесс в начале и конце эксперимента изменилось незначительно. Общее количество четвертей вымени с маститом до начала эксперимента было 81, после окончания –78, при этом количество четвертей со скрытым маститом до начала исследования было 75, после окончания –73. Таким образом, через месяц после начала применения комплекса мероприятий отмечено уменьшение количества коров, имеющих воспаление в одной или нескольких четвертях вымени с 42,6% до 36,5%. При этом на 35,0% сократилось количество коров, имеющих клинически выраженный мастит, с 17 до 11 голов. Количество пораженных четвертей уменьшилось по сравнению с исходными данными на 17,5%, при этом количество скрытых маститов сократилось на 11,3%. В контрольной группе количество пораженных четвертей осталась практически без изменения.Исследования по профилактике заболеваний молочной железы коров с использованием средств, содержащих пробиотические культуры, выполнены в 2013 году на базе ЗАО «Щелкунское» Свердловской области на коровах чернопестрой породы типа «Уральский» со среднегодовой молочной продуктивностью 4960 тыс. кг. Содержание животных привязное круглогодичное. Доение осуществляется в молокопровод 2 раза в сутки.
Научнопроизводственный опыт выполнен на двух группах корованалогов в стадию лактации, которые содержались в разных корпусах, 104 и 98 голов соответственно. Для обмывания вымени перед доением использовали средство PIPPWв концентрации 0,2%. Для орошения сосков после доения применяли средство PIPСТС в концентрации 4%, которое наносили при помощи пульверизатора непосредственно после снятия доильного аппарата, распыляя препарат снизу вверх от верхушки соска в течение 23 секунд. В контрольной группе содержание и уход осуществлялись по используемой в хозяйстве технологии. Обмывание вымени проводилось с использованием Кенопура, а обработка сосков после доения не производилась.Перед началом использования пробиотических средств провели исследование состояния молочной железы коров, включающее исследование на скрытый мастит с использованием быстрых маститных тестов (Кенотест) и молочных пластинок. Еженедельно на протяжении месяца опыта проводили исследование сборного молока из молочных танков опытного и контрольного корпусов путем прямого подсчета количества соматических клеток на счетчике соматических клеток DeLaval.Повторное исследование на скрытый мастит и оценку состояния сосков вымени проводили ежемесячно в течение 3х месяцев. Изучение уровня заболеваемости коров скрытыми маститами в опытной и контрольной группах показало, что положительная реакция с маститным тестом отмечается у 60,9% животных опытной группы и у 50,0% коров контрольной группы, при этом отрицательная реакция была зафиксирована у 19,6% коров опытной и у 23,3 % коров контрольной группы (рисунок 2). Таким образом, в опытной группе уровень скрытых маститов до начала исследования был на 8,6% выше, чем в контрольной, а количество животных, не имеющих изменений в молочной железе в опытной группе было ниже на 5,9% .
Рис.2. Уровень скрытых маститов у животных опытной группы
Анализ данных, полученных после месяца использования пробиотических продуктов, показал, что количество животных, не имеющих патологии молочной железы, увеличилось в 1,5 раза по сравнению с исходными данными, а количество голов с положительной и резкоположительной реакциейна мастит уменьшилось в 1,5 раза, при этом количество коров с резкоположительной реакцией сократилось в 2,3 раза и составило 12,3% всех обследованных коров. При повторных исследованиях сохранялась положительная тенденция. Через 2 месяца использования средств количество коров с отрицательной реакцией увеличилось в 1,4 раза по сравнению с данными предшествующего исследования и в 2,2 раза по сравнению с исходными показателями.
Через 3 месяца применения количество коров с положительной и резкоположительной реакцией сократилось в 3 раза относительной исходных данных, а с отрицательной увеличилось в 1,2 раза по сравнениюс предыдущим месяцем и в 2,7 раза по сравнению с исходными данными. В контрольной группе положительной тенденции отмечено не было. в течение 3х месяцев произошло сокращение количества животных с отрицательной реакциейв 1,5 раза (рисунок 3).
Рис. 3.Уровень скрытых маститов у коров контрольной группы
При анализе распространенности скрытого мастита по долям выменибыло зафиксировано снижение количества четвертей со скрытым маститом в опытной группе втечение 3месяцев использования средств в 3,6 раза, с одновременным увеличением количества четвертей с отрицательнойреакцией в 1,3 раза (рисунок 4).
Рис.4.Уровень заболеваемости маститом по четвертям вымени у коров опытной группы
Таким образом, применение обработки молочной железы средствами PIP Plus Water и PIP Cow Teat Cleaner позволяет в течение одного месяца снизить распространение в стаде скрытого маститаи поддерживать его на низком уровне. В то же время, выраженного влияния на уровень заболеваемости животных клиническими формами воспаления молочной железы за этот период профилактическая обработка не оказала. Уровень клинических маститов находится в пределах 45%. Однако снижение уровня скрытых маститов и предмаститных состояний может положительно повлиять на здоровье вымени животных в дальнейшем.В контрольной группе отмечено увеличение количества четвертей с положительной и резкоположительной реакцией в2,1 раза (с 69 до 84,5%), при сокращении количества четвертей с отрицательной реакцией в 1,6раза. (с 45 до 28%) (рисунок 5).
Рис.5.Уровень заболеваемости маститом по четвертям вымени у коров контрольной группы
Таким образом, применение указанных средств позволяет сократить количество животных в стаде, имеющих субклинический мастит, так как пробиотические агенты препятствуют размножению патогенных микроорганизмов на коже сосков и вымени.Исследование влияния пробиотических средств на качество сырого молока проводились в 201314гг. в ходе проведения экспериментов в ФГУП «Учхоз «Уралец» (включая пробиотическую очистку помещения коровника), ЗАО «Щелкункое» и СПК «Килачевский» (обработка вымени).В ФГУП «Учхоз «Уралец» перед началом опыта по применению пробиотических препаратов провели взятие проб молока для лабораторного исследования, определялись следующие показатели: жир, белок, лактоза, СОМО, соматические клетки, которое проводилось на базе ООО «Уралплемцентр» с применением комбинированной системы BentleySomacount. Повторное взятие проб молока проводили после окончания применения исследуемых средств. Изучение уровня соматических клеток в сборном молоке, полученном от коров опытной группы, проводили еженедельно на протяжении всего опытного периода с использованием счетчика соматических клеток фирмы DeLaval, в котором подсчет происходит с использованием флуорисцентнооптического метода определения количества клеток.Изучение показателей качества молока проводили только у животных с содержанием соматических клеток менее 1 млн./мл, так как содержание соматических клеток более 1 млн./мл подразумевает наличие отклонений в составе секрета. Анализ показателей качества молока от коров опытной группы показал наличие изменений, указывающих на повышение качества молока. Отмечено повышение содержания жира на 4,9%, лактозы на 1,8% и снижение количества белка на 4,7%(таблица 4). В контрольной группе уровень белка увеличился на 1,5%, а уровень лактозы понизился на 1,4%, что может свидетельствовать о повышении содержания сывороточных протеинов на фоне воспалительных заболеваний вымени и сокращении количества секреторных клеток, в которых происходит формирование лактозы.
Таблица 4Показатели качества молока
ПоказательНачало опытаОкончание опытаБеспривязное содержаниеn=118Привязное содержаниеn=123Беспривязное содержаниеn=97Привязное содержаниеn=109Удой, кг21,21±0,5420,84±0,5523,30±0,5919,34±0,64Жир, %4,04±0,064,0±0,064,24±0,074,1±0,06Белок, %3,35±0,033,32±0,033,37±0,033,35±3,37Лактоза, %4,27±0,014,28±0,014,35±0,014,27±0,02СОМО, %12,46±0,0712,67±0,0812,64±0,0812,80±0,08Соматические клетки,тыс./мл233,11±19,61264,27±23,31280,11±23,78295,98±24,37
В связи с тем, что уровень соматических клеток в молоке более 1 млн. в мл свидетельствует об инфицировании вымени, то данные по этим животным были проанализированы дополнительно . В опытной группе до начала обработки было выявлено 21 животное с уровнем соматических клеток более 1 млн. в мл, после окончания обработки –22, то есть осталось практически без изменения. В контрольной группе до начала обработки было зафиксировано 22 головы с высоким уровнем соматических клеток, а после окончания опыта их количество повысилось в 2 раза и составило 41 голову.
Исследование сборного молока отгруппы опытных коров с использованием счетчика соматических клеток фирмы DeLaval показало, что уровень соматических клеток являлся показателем не стабильным(рис. 6). Изменение его связано было в значительной мере с соблюдением технологии машинного доения. До начала производственного испытания уровень соматических клеток в молоке регистрировался на уровне 647 тыс./мл. Через 2 недели произошло увеличение уровня соматических клеток в 1,3 раза по сравнению с исходным показателем, а через 21 день после начала применения пробиотических средств резкое снижение их уровня в 2,7 раза по сравнению с исходным показателем и в 3,5 раза по сравнению с результатами предыдущего исследования.
Рис.6.Количество коров с содержанием соматических клеток более 1 млн./ мл.
В ЗАО «Щелкунское» проводили исследование молока из молочного танка опытного и контрольного дворов 1 раз в неделю в течение месяца и анализировали с использование счетчика соматических клеток фирмы DeLaval. Анализ проб молока из молочного танка опытной группы через 7 дней от начала пробиотической обработки вымени показал уровень соматических клеток 453 тыс./мл, в контрольной группе –555 тыс./мл . Через 14 дней обработки уровень соматических клеток в опытной группе составил 388 тыс./мл, а в контрольной –599 тыс./мл, что в 1,5 раза выше чем в опытной. Через 21 день обработки продолжала сохраняться положительная тенденция, в опытной группе количество соматических клеток определялось на уровне 385 тыс./мл, а в контрольной –на уровне 660 тыс./мл, данные показатели сохранились к 28 дню использования средств –365 тыс./мл в опытной группе, 665 тыс./мл –в контрольной. Для оценки влияния пробиотических продуктов на уровень соматических клеток в молоке в СПК «Килачевский» выполнен научнопроизводственный опыт на двух группах животных по 35 и 39 голов в каждой. Проведено исследование молока с определением уровня соматических клеток в селекционной лаборатории "Уралплемцентра" с применением счетчика соматических клеток Somacount, ежемесячно в течение четырех месяцев. Использование данного способа позволило получить данные прямого подсчета соматических клеток непосредственно от каждого животного находящегося в опытной и контрольной группах. В опытной группе использовались средства PIP PW в концентрации 0,2% для обработки вымени до доения и PIP CTC в концентрации 4% для обработки сосков после доения. В контрольной группе для обработки вымени до доения использовали раствор перекиси водорода и мыло, после доения –йодсодержащий препарат Дипал. В группе с использованием пробиотических продуктов через 3 месяца применения было выявлено 31,4% коров с количеством соматических клеток постоянно находящимся на уровне менее 100 тыс./мл, 11,4% коров –с уровнем ниже 200 тыс./мл и 17,1% животных с уровнем ниже 400 тыс./мл. При этом разовые повышения до 1 млн./мл отмечались у 8,6% коров, на таком же уровне находился процент животных с повышением более 1 млн. (8,6%). На протяжении исследования у 62,8% коров уровень соматических клеток стабильнонаходился ниже 400 тыс./мл, постоянно высокийуровень соматических клеток (от 600 и выше) зафиксирован у 17,1% коров(рисунок 7). В группе с использованием йодсодержащего средства через 3 месяца применения животных с постоянным уровнем соматических клеток менее 100 тыс./мл выявлено не было. 25,6% коров имели стабильный уровень соматических клеток менее 200 тыс./мл, а 12,8% голов –ниже 400 тыс./мл. Разовые скачки до 1 млн./мл отмечались у 7,7% коров, в то время как повышение более 1 млн. соматических клеток фиксировались у 18% животных. Стабильный уровень соматических клеток менее 400 тыс./мл отмечен у 38,5% коров (15 голов), что в 1,6 раза ниже, чем в опытной группе.
Рис.7.Распределение коров в зависимости от уровня соматических клеток
Таким образом, применение пробиотических средств в программе профилактики маститов позволяет поддерживать в норме состояние здоровья вымени, что подтверждается наличием в опытной группе животных с постоянным уровнем соматических клеток менее 100 тыс./мл, в то время как в контрольной таких коров зафиксировано не было. В группе, в которой использовались пробиотические продукты отмечено в 1,8 раза больше коров, имеющих стабильно уровень соматических клеток менее 400 тыс./мл. Также в опытной группе в 2,1 раза реже фиксируются резкие повышения уровня соматических клетокболее 1 млн., что также подтверждает эффективность указанных средств. На основании проведенного исследования можно заключить, что прибиотические препараты для обработки вымени лактирующих коров способствуют предотвращению распространения мастита по стаду, оказывают положительное влияние на качественный состав молока и содержание в нем соматических клеток. Наиболее выраженный и стойкий эффект от использования указанных средств достигается при применении их не менее 34 месяцев.
Ссылки на источники1.Бакулов И.А.Методикаэпизоотологического исследования / И.А.Бакулови др.// Москва.1975 .С.212.Бакулов И.А.Проявление эпизоотического процесса и оценка его интенсивности /И.А. Бакулов и др.//Москва.1979.С.123. Джупина С.И.Методы эпизоотологического исследования и теория эпизоотического процесса /Джупина С.И.//Москва .1991С.27.4.Донник И.М.. Большаков В Н. Экологические аспекты агропромышленного производства Уральского региона. Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц. Сборник научных трудов ведущих ученых России и Зарубежья. Выпуск 3 С. 52 605.Петрова О.Г. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота/ О.Г.Петрова, Н.И.Кушнир, М.Ф.Хаматови др.//Екатеринбург .2007.278 с.6.Петрова О.Г.Респираторныезаболевания животных и птиц с учетом экологических особенностей территории./О.Г.Петрова и др.//Екатеринбург.2012
Барашкин Михаил Иванович,кандидат ветеринарных наук, декан,ФГБОУ ВПО«Уральский государственный аграрный университет»,г.Екатеринбургdecanatvet@mail.ru
Эффективность применения пробиотических средств фирмы Chrisal
для профилактики заболеваний вымени коровпри промышленных технологиях содержания
Аннотация. В последнее время значительно вырос уровень использования антибиотиков, в том числе последних поколений, отмечается ускорение эволюции микроорганизмов и выработка у них устойчивости к воздействию лекарственных препаратов. Также у высокопродуктивных коров отмечаются широко распространенные дисфункции иммунитета, проявляющиеся увеличением заболеваемости. Таким образом, важным являлось установить видовой состав микрофлоры, присутствующей на молочнотоварных фермах Свердловской области и изучить эффективность применения пробиотических препаратов.Ключевые слова:пробиотические препараты, маститы, микрофлора, вымя,спектр микроорганизмов.
Заболевание маститом наиболее часто вызывают такие бактерии как Streptococcusagalactiae; Streptococcusuberis; Streptococcusdysgalacticae; Staphylococcusaureus,которые являются грамположительными кокками. Эти микроорганизмы хорошо адаптировались к росту в молоке и выделяют ферменты, вызывающие свертывание молока и распад гликопротеидов.Кроме них встречаются колиформы, в том числе Escherichiacoli, которая входит в эту группу. К этой группе относятся также Enterobacter, Klebsiella, Citrobacterи другие бактерии. Мастит, вызванный этими возбудителями, составляет 15% от всех случаев заболевания и чаще приводит развитию тяжелых форм клинического мастита, чем стрептококковые или стафилококковые инфекции. Также из секрета молочной железы могут выделяться микоплазмы, вирусы, грибы [1].Определение состава микрофлоры в ФГУП «Учхоз «Уралец» в 2014году проводили на базе МБУ «Клиникодиагностический центр». Для бактериологического исследования в стерильные пробирки с питательной средой брали смывы с поверхности рук доярки, внутренней поверхности доильных стаканов во время доения коров, пробы остаточного молока и патологического секрета молочной железы. Всего былоисследовано 40 проб. В лаборатории микробиологии проводили посев на питательные среды с определением чувствительности к антибиотикам. Изучение микробного фона на молочнотоварной ферме учхоза «Уралец» показало наличие таких патогенных микроорганизмов какStreptococcusagalactiae, Escherichiacoli, Pseudomonasaeruginosa, Klebsiellapneumonia(табл. 1). Проведенное исследование показало наличие на поверхности вымени в 5% проб Pseudomonasaeruginosa, в 40% проб идентифицировалась Escherichiacoli, в том числе в 25% проб в ассоциации с Klebsiellapneumonia. В секрете молочной железы были выявлены такие патологические микроорганизмы как Streptococcusagalactiaeи Escherichiacoli, приэтом Streptococcusagalactiaeбыл высеян в 30% проб, а Escherichiacoli–в5% проб.
Таблица 1Видовой состав микрофлоры на поверхности вымени и в секрете
ПробыВид микроорганизмовPseudomonasaeruginosaEscherichiacoliStreptococcusagalactiaeKlebsiellapneumoniaСмывы с поверхности вымени++
+Секрет вымени
++
Исследования видового состава микроорганизмов секрета молочной железы в ряде сельхозпредприятий и у животных принадлежащих частным владельцам Ирбитского района Свердловской области проводили в 201314годах на базе ГУБСО «Ирбитская зональная ветеринарная лаборатория».Из 74 исследованных проб секрета вымени культуры микроорганизмов были выявлены в 56 пробах. Из числа выделенных культур доминирующим был Staphilococccusaureus, он был обнаружен в 38 пробах. Из 10 исследованных проб выделены культуры Esсheriсhiacoli, из 8 проб –микроскопические грибы рода Candida(таблица 2). В 18 пробах возбудитель выявлен не был, что возможно связано с селективными особенностями сред.
Таблица 2Спектр микроорганизмов, выделенных от больных маститом коров
Возбудитель маститаПроб с положительным результатом, %Чувствительность к противомикробному средствуStaphilococccus aureus51,35НеомицинEscherichia coli13,51ЭнроксилCandida10,81Клотримазол
Спектр выделенных микроорганизмов из проб, взятых в разных сельхозпредприятиях Свердловской области, отличался. В колхозе «Урал» во всех 30 пробах был обнаружен Staphylococcusaureus, СПК «Килачевский» золотистый стафилококк выделен из 40% проб, в агрофирме «Ирбитская» –в 15% проб. Кроме того, в последнем хозяйстве из 40% исследованных проб секрета выделены микроскопические грибы рода Candida. Кишечная палочка была выделена из 71,4% проб секрета вымени коров, принадлежащих частным владельцам.Сравнение полученных результатов с данными предыдущих лет показывает, что в настоящее время в высокопродуктивных стадах Свердловской области снижается количество маститов стрептококковой этиологии, увеличивается стафилококковой. Кроме того, увеличивается количество маститов грибковой этиологии, чему способствует широкое использование антибиотиков[2].Таким образом, применение антибиотиков и антисептиков отрицательно повлияло на микробиоценоз молочной железы коров, что показывает необходимость разработки методов их коррекции.Альтернативой использования дезинфицирующих средств и антибиотиков является применение средств на основе пробиотиков как для обработки вымени после доения, так и для аэрозольной обработки животноводческих помещений для создания в них благоприятного микроклимата [3, 4]. В основе действия микробиологических препаратов для обработки вымени коров, лежат антагонистические взаимоотношения между патогенными микроорганизмами и культурами пробиотиков, входящими в состав применяемых препаратов.Изучение влияния комплекса пробиотических препаратов на состояние молочной железы и сосков вымени коров проводили в 2014г. на базе МТФ учхоза «Уралец». В наших исследованиях были использованы средства фирмы Chrisal(Бельгия), содержащие пробиотики: PipPlusWater(PIP PW) –для обработкиводы и кормов, PipCowTeatCleaner(PIP CTC) –дляобработки вымени коров и PipAnimalHousingStabilizer(PIPAHS) –для санации стойл и мест пребывания животных.В основе биопрепаратов лежит ассоциация штаммов аэробных строго сапрофитных микроорганизмов: Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus pumilus и Bacillus megaterium. Данные комплексные концентрированные микробиологические продукты с одной стороны активно воздействуют на патогенную микрофлору и частицы грязи, а с другой стороны формируют полезную для здоровья и безопасную микрофлору. Также с состав продуктов входят ферменты и энзимы, которые обеспечивают очищение поверхностей от механических загрязнений[5,6].Научнопроизводственный опыт проведен на двух группах лактирующих коров, в опытную группу входило 148 голов, в контрольную –149.Животные содержались в разных корпусах, продолжительность опыта составляла 1 месяц.Для создания благоприятного микроклимата в корпусе проводили аэрозольную обработку стен, настила, бетонных полов, животных, средством PIPAHS из расчета 1 литр концентратана 300 м2площади. Средство распыляли с использованием пульверизатора объёмом 5 л со шлангом в присутствии животных. В течение первых 7 дней обработку производили ежедневно, затем –1раз в 3 дня .Для орошения кормов и обмывания вымени перед доением использовали средство PIPPWв концентрации 0,5%, а для опрыскивания внутренней поверхности доильных стаканов после доения –в концентрации 5%. Обработку кормов проводили 1 раз сутки, доильных стаканов –после окончания каждой дойки. Обмывание вымени раствором PIPPWпроводили из отдельной ёмкости объемом 1 литр с использованием салфетки из нетканого материала непосредственно после механической и влажной очистки вымени водопроводной водой перед доением. Для орошения сосков после доения применяли средство PIPСТС, которое наносили при помощи пульверизатора непосредственно после снятия доильного аппарата, распыляя препарат снизу вверх от верхушки соска в течение 23 секунд. В течение первой недели использовали средство в концентрации 7%, в течение второй недели –5%, затем концентрацию снизили до 3%. В контрольной группе содержание и уход осуществлялись по используемой в хозяйстве технологии. За время проведения эксперимента дезинфекция корпуса не проводилась. Соски вымени после доения обрабатывали йодсодержащим препаратом Dipal, который наносили на соски после снятия доильного аппарата методом погружения их в специальный стаканчик. Перед началом опыта по применению пробиотических препаратов провели исследование всех коров на скрытый мастит с помощью быстрого маститного теста. Повторное исследование на скрытый мастит проводили в конце опытного периода. Изучение влияния комплекса пробиотических препаратов на воспалительные заболевания вымени коров показало, что после его применения произошло снижение количества голов, имеющих воспаление в одной или нескольких четвертях вымени с 42,6% до 36,5% (таблица. 3). При этом на 35,0% сократилось количество коров, имеющих клинически выраженный мастит, с 17 до 11 голов.
Таблица 3Заболеваемость коров маститами при применении комплекса пробиотических средств
Форма маститаНачало опытаОкончание опытаОпытная группаКонтрольная группаОпытная группаКонтрольная группаСубклинический мастит, %24,335,522,331,5Клинический мастит, %11,53,47,42,0
При исследовании намастит количество пораженных четвертей уменьшилось по сравнению с исходными данными на 17,5%, с 80 до 66 четвертей, при этом количество скрытых маститов сократилось на 11,3%, с 62 до 55 четвертей (рисунок 1).
Рис.1. Изменение уровня пораженных четвертей вымени на фоне применения пробиотических препаратов
В контрольной группе при исследовании на мастит в конце опытного периода отмечено снижение количества голов, имеющих одну или более пораженную четверть, однако общее количество четвертей, имеющих воспалительных процесс в начале и конце эксперимента изменилось незначительно. Общее количество четвертей вымени с маститом до начала эксперимента было 81, после окончания –78, при этом количество четвертей со скрытым маститом до начала исследования было 75, после окончания –73. Таким образом, через месяц после начала применения комплекса мероприятий отмечено уменьшение количества коров, имеющих воспаление в одной или нескольких четвертях вымени с 42,6% до 36,5%. При этом на 35,0% сократилось количество коров, имеющих клинически выраженный мастит, с 17 до 11 голов. Количество пораженных четвертей уменьшилось по сравнению с исходными данными на 17,5%, при этом количество скрытых маститов сократилось на 11,3%. В контрольной группе количество пораженных четвертей осталась практически без изменения.Исследования по профилактике заболеваний молочной железы коров с использованием средств, содержащих пробиотические культуры, выполнены в 2013 году на базе ЗАО «Щелкунское» Свердловской области на коровах чернопестрой породы типа «Уральский» со среднегодовой молочной продуктивностью 4960 тыс. кг. Содержание животных привязное круглогодичное. Доение осуществляется в молокопровод 2 раза в сутки.
Научнопроизводственный опыт выполнен на двух группах корованалогов в стадию лактации, которые содержались в разных корпусах, 104 и 98 голов соответственно. Для обмывания вымени перед доением использовали средство PIPPWв концентрации 0,2%. Для орошения сосков после доения применяли средство PIPСТС в концентрации 4%, которое наносили при помощи пульверизатора непосредственно после снятия доильного аппарата, распыляя препарат снизу вверх от верхушки соска в течение 23 секунд. В контрольной группе содержание и уход осуществлялись по используемой в хозяйстве технологии. Обмывание вымени проводилось с использованием Кенопура, а обработка сосков после доения не производилась.Перед началом использования пробиотических средств провели исследование состояния молочной железы коров, включающее исследование на скрытый мастит с использованием быстрых маститных тестов (Кенотест) и молочных пластинок. Еженедельно на протяжении месяца опыта проводили исследование сборного молока из молочных танков опытного и контрольного корпусов путем прямого подсчета количества соматических клеток на счетчике соматических клеток DeLaval.Повторное исследование на скрытый мастит и оценку состояния сосков вымени проводили ежемесячно в течение 3х месяцев. Изучение уровня заболеваемости коров скрытыми маститами в опытной и контрольной группах показало, что положительная реакция с маститным тестом отмечается у 60,9% животных опытной группы и у 50,0% коров контрольной группы, при этом отрицательная реакция была зафиксирована у 19,6% коров опытной и у 23,3 % коров контрольной группы (рисунок 2). Таким образом, в опытной группе уровень скрытых маститов до начала исследования был на 8,6% выше, чем в контрольной, а количество животных, не имеющих изменений в молочной железе в опытной группе было ниже на 5,9% .
Рис.2. Уровень скрытых маститов у животных опытной группы
Анализ данных, полученных после месяца использования пробиотических продуктов, показал, что количество животных, не имеющих патологии молочной железы, увеличилось в 1,5 раза по сравнению с исходными данными, а количество голов с положительной и резкоположительной реакциейна мастит уменьшилось в 1,5 раза, при этом количество коров с резкоположительной реакцией сократилось в 2,3 раза и составило 12,3% всех обследованных коров. При повторных исследованиях сохранялась положительная тенденция. Через 2 месяца использования средств количество коров с отрицательной реакцией увеличилось в 1,4 раза по сравнению с данными предшествующего исследования и в 2,2 раза по сравнению с исходными показателями.
Через 3 месяца применения количество коров с положительной и резкоположительной реакцией сократилось в 3 раза относительной исходных данных, а с отрицательной увеличилось в 1,2 раза по сравнениюс предыдущим месяцем и в 2,7 раза по сравнению с исходными данными. В контрольной группе положительной тенденции отмечено не было. в течение 3х месяцев произошло сокращение количества животных с отрицательной реакциейв 1,5 раза (рисунок 3).
Рис. 3.Уровень скрытых маститов у коров контрольной группы
При анализе распространенности скрытого мастита по долям выменибыло зафиксировано снижение количества четвертей со скрытым маститом в опытной группе втечение 3месяцев использования средств в 3,6 раза, с одновременным увеличением количества четвертей с отрицательнойреакцией в 1,3 раза (рисунок 4).
Рис.4.Уровень заболеваемости маститом по четвертям вымени у коров опытной группы
Таким образом, применение обработки молочной железы средствами PIP Plus Water и PIP Cow Teat Cleaner позволяет в течение одного месяца снизить распространение в стаде скрытого маститаи поддерживать его на низком уровне. В то же время, выраженного влияния на уровень заболеваемости животных клиническими формами воспаления молочной железы за этот период профилактическая обработка не оказала. Уровень клинических маститов находится в пределах 45%. Однако снижение уровня скрытых маститов и предмаститных состояний может положительно повлиять на здоровье вымени животных в дальнейшем.В контрольной группе отмечено увеличение количества четвертей с положительной и резкоположительной реакцией в2,1 раза (с 69 до 84,5%), при сокращении количества четвертей с отрицательной реакцией в 1,6раза. (с 45 до 28%) (рисунок 5).
Рис.5.Уровень заболеваемости маститом по четвертям вымени у коров контрольной группы
Таким образом, применение указанных средств позволяет сократить количество животных в стаде, имеющих субклинический мастит, так как пробиотические агенты препятствуют размножению патогенных микроорганизмов на коже сосков и вымени.Исследование влияния пробиотических средств на качество сырого молока проводились в 201314гг. в ходе проведения экспериментов в ФГУП «Учхоз «Уралец» (включая пробиотическую очистку помещения коровника), ЗАО «Щелкункое» и СПК «Килачевский» (обработка вымени).В ФГУП «Учхоз «Уралец» перед началом опыта по применению пробиотических препаратов провели взятие проб молока для лабораторного исследования, определялись следующие показатели: жир, белок, лактоза, СОМО, соматические клетки, которое проводилось на базе ООО «Уралплемцентр» с применением комбинированной системы BentleySomacount. Повторное взятие проб молока проводили после окончания применения исследуемых средств. Изучение уровня соматических клеток в сборном молоке, полученном от коров опытной группы, проводили еженедельно на протяжении всего опытного периода с использованием счетчика соматических клеток фирмы DeLaval, в котором подсчет происходит с использованием флуорисцентнооптического метода определения количества клеток.Изучение показателей качества молока проводили только у животных с содержанием соматических клеток менее 1 млн./мл, так как содержание соматических клеток более 1 млн./мл подразумевает наличие отклонений в составе секрета. Анализ показателей качества молока от коров опытной группы показал наличие изменений, указывающих на повышение качества молока. Отмечено повышение содержания жира на 4,9%, лактозы на 1,8% и снижение количества белка на 4,7%(таблица 4). В контрольной группе уровень белка увеличился на 1,5%, а уровень лактозы понизился на 1,4%, что может свидетельствовать о повышении содержания сывороточных протеинов на фоне воспалительных заболеваний вымени и сокращении количества секреторных клеток, в которых происходит формирование лактозы.
Таблица 4Показатели качества молока
ПоказательНачало опытаОкончание опытаБеспривязное содержаниеn=118Привязное содержаниеn=123Беспривязное содержаниеn=97Привязное содержаниеn=109Удой, кг21,21±0,5420,84±0,5523,30±0,5919,34±0,64Жир, %4,04±0,064,0±0,064,24±0,074,1±0,06Белок, %3,35±0,033,32±0,033,37±0,033,35±3,37Лактоза, %4,27±0,014,28±0,014,35±0,014,27±0,02СОМО, %12,46±0,0712,67±0,0812,64±0,0812,80±0,08Соматические клетки,тыс./мл233,11±19,61264,27±23,31280,11±23,78295,98±24,37
В связи с тем, что уровень соматических клеток в молоке более 1 млн. в мл свидетельствует об инфицировании вымени, то данные по этим животным были проанализированы дополнительно . В опытной группе до начала обработки было выявлено 21 животное с уровнем соматических клеток более 1 млн. в мл, после окончания обработки –22, то есть осталось практически без изменения. В контрольной группе до начала обработки было зафиксировано 22 головы с высоким уровнем соматических клеток, а после окончания опыта их количество повысилось в 2 раза и составило 41 голову.
Исследование сборного молока отгруппы опытных коров с использованием счетчика соматических клеток фирмы DeLaval показало, что уровень соматических клеток являлся показателем не стабильным(рис. 6). Изменение его связано было в значительной мере с соблюдением технологии машинного доения. До начала производственного испытания уровень соматических клеток в молоке регистрировался на уровне 647 тыс./мл. Через 2 недели произошло увеличение уровня соматических клеток в 1,3 раза по сравнению с исходным показателем, а через 21 день после начала применения пробиотических средств резкое снижение их уровня в 2,7 раза по сравнению с исходным показателем и в 3,5 раза по сравнению с результатами предыдущего исследования.
Рис.6.Количество коров с содержанием соматических клеток более 1 млн./ мл.
В ЗАО «Щелкунское» проводили исследование молока из молочного танка опытного и контрольного дворов 1 раз в неделю в течение месяца и анализировали с использование счетчика соматических клеток фирмы DeLaval. Анализ проб молока из молочного танка опытной группы через 7 дней от начала пробиотической обработки вымени показал уровень соматических клеток 453 тыс./мл, в контрольной группе –555 тыс./мл . Через 14 дней обработки уровень соматических клеток в опытной группе составил 388 тыс./мл, а в контрольной –599 тыс./мл, что в 1,5 раза выше чем в опытной. Через 21 день обработки продолжала сохраняться положительная тенденция, в опытной группе количество соматических клеток определялось на уровне 385 тыс./мл, а в контрольной –на уровне 660 тыс./мл, данные показатели сохранились к 28 дню использования средств –365 тыс./мл в опытной группе, 665 тыс./мл –в контрольной. Для оценки влияния пробиотических продуктов на уровень соматических клеток в молоке в СПК «Килачевский» выполнен научнопроизводственный опыт на двух группах животных по 35 и 39 голов в каждой. Проведено исследование молока с определением уровня соматических клеток в селекционной лаборатории "Уралплемцентра" с применением счетчика соматических клеток Somacount, ежемесячно в течение четырех месяцев. Использование данного способа позволило получить данные прямого подсчета соматических клеток непосредственно от каждого животного находящегося в опытной и контрольной группах. В опытной группе использовались средства PIP PW в концентрации 0,2% для обработки вымени до доения и PIP CTC в концентрации 4% для обработки сосков после доения. В контрольной группе для обработки вымени до доения использовали раствор перекиси водорода и мыло, после доения –йодсодержащий препарат Дипал. В группе с использованием пробиотических продуктов через 3 месяца применения было выявлено 31,4% коров с количеством соматических клеток постоянно находящимся на уровне менее 100 тыс./мл, 11,4% коров –с уровнем ниже 200 тыс./мл и 17,1% животных с уровнем ниже 400 тыс./мл. При этом разовые повышения до 1 млн./мл отмечались у 8,6% коров, на таком же уровне находился процент животных с повышением более 1 млн. (8,6%). На протяжении исследования у 62,8% коров уровень соматических клеток стабильнонаходился ниже 400 тыс./мл, постоянно высокийуровень соматических клеток (от 600 и выше) зафиксирован у 17,1% коров(рисунок 7). В группе с использованием йодсодержащего средства через 3 месяца применения животных с постоянным уровнем соматических клеток менее 100 тыс./мл выявлено не было. 25,6% коров имели стабильный уровень соматических клеток менее 200 тыс./мл, а 12,8% голов –ниже 400 тыс./мл. Разовые скачки до 1 млн./мл отмечались у 7,7% коров, в то время как повышение более 1 млн. соматических клеток фиксировались у 18% животных. Стабильный уровень соматических клеток менее 400 тыс./мл отмечен у 38,5% коров (15 голов), что в 1,6 раза ниже, чем в опытной группе.
Рис.7.Распределение коров в зависимости от уровня соматических клеток
Таким образом, применение пробиотических средств в программе профилактики маститов позволяет поддерживать в норме состояние здоровья вымени, что подтверждается наличием в опытной группе животных с постоянным уровнем соматических клеток менее 100 тыс./мл, в то время как в контрольной таких коров зафиксировано не было. В группе, в которой использовались пробиотические продукты отмечено в 1,8 раза больше коров, имеющих стабильно уровень соматических клеток менее 400 тыс./мл. Также в опытной группе в 2,1 раза реже фиксируются резкие повышения уровня соматических клетокболее 1 млн., что также подтверждает эффективность указанных средств. На основании проведенного исследования можно заключить, что прибиотические препараты для обработки вымени лактирующих коров способствуют предотвращению распространения мастита по стаду, оказывают положительное влияние на качественный состав молока и содержание в нем соматических клеток. Наиболее выраженный и стойкий эффект от использования указанных средств достигается при применении их не менее 34 месяцев.
Ссылки на источники1.Бакулов И.А.Методикаэпизоотологического исследования / И.А.Бакулови др.// Москва.1975 .С.212.Бакулов И.А.Проявление эпизоотического процесса и оценка его интенсивности /И.А. Бакулов и др.//Москва.1979.С.123. Джупина С.И.Методы эпизоотологического исследования и теория эпизоотического процесса /Джупина С.И.//Москва .1991С.27.4.Донник И.М.. Большаков В Н. Экологические аспекты агропромышленного производства Уральского региона. Современные проблемы диагностики, лечения и профилактики болезней животных и птиц. Сборник научных трудов ведущих ученых России и Зарубежья. Выпуск 3 С. 52 605.Петрова О.Г. Острые респираторные заболевания крупного рогатого скота/ О.Г.Петрова, Н.И.Кушнир, М.Ф.Хаматови др.//Екатеринбург .2007.278 с.6.Петрова О.Г.Респираторныезаболевания животных и птиц с учетом экологических особенностей территории./О.Г.Петрова и др.//Екатеринбург.2012
