Оценка уровня экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации почки
ART 971089
А.
М. ТокареваБиблиографическое описание статьи для цитирования:
Токарева
А.
М.,
Хромова
Е.
Б.,
Вавилов
М.
Н.,
Журавлёва
Л.
Ю. Оценка уровня экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации почки // Научно-методический электронный журнал «Концепт». –
2017. – Т. 39. – С.
3811–3815. – URL:
http://e-koncept.ru/2017/971089.htm.
Аннотация. MICA и MICB являются высокополиморфными генами, расположенными рядом с локусами HLA I класса, и экспрессируются на клетках в ответ на стресс. Несовместимые доноры и реципиенты по антигенам MIC могут стимулировать выработку антител к ним. Мы исследовали уровень экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации и соотнесли изменения с клиническими событиями.
Финансирование
Текст статьи
Токарева Анна Михайловна,магистр второго года обучения кафедры микробиологии, иммунологии и общей биологии ФГБОУ ВО «Челябинский государственный университет», биолог отдела молекулярнобиологической диагностики ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови», г. Челябинскannette.92@mail.ru
Хромова Елена Борисовна,кандидат биологических наук, доцент кафедры микробиологии, иммунологии и общей биологии ФГБОУ ВО «Челябинский государственный университет», г.Челябинскeb_sh@mail.ru
Вавилов Михаил Николаевич,биолог отдела молекулярнобиологической диагностики ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови», г. Челябинскvavlakhim@mail.ru
Журавлёва Людмила Юрьевна,заведующая отделением ГБУЗ «Челябинская областная клиническая больница» г.Челябинскmilana_1610@mail.ru
Оценка уровня экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации почки
Аннотация. MICA и MICB являются высокополиморфными генами, расположенными рядом с локусами HLAI класса, и экспрессируютсяна клетках в ответ на стресс. Несовместимые доноры и реципиенты по антигенам MIC могут стимулировать выработку антител к ним. Мы исследовали уровень экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации и соотнесли изменения с клиническими событиями.Ключевые слова: экспрессия генов, MICА, MICВ, трансплантация почки.
Гены MICA и MICB (MICA/B) располагаются на коротком плече 6 хромосомы рядом с генами HLA I класса:HLA A и B (MHC class I chainrelated antigenA, В –MICA, MICB) и являются минорными антигенами гистосовместимости [1].MICA/B являются лигандом молекулы NKG2D –активирующего рецептора клеток NK и CD8 [2,1]. Связываясь с лигандом, они способны активировать клетки CD4 и CD8, инициируя иммунный ответ, проявляющийся в виде реакции отторжения даже при отсутствии HLAантител [1].В физиологических условиях белки MICA/B представлены в основном на поверхности эпителиальных клеток желудочнокишечного тракта, но начинают активно экспрессироваться на поверхности других клеток при вирусных инфекциях, действии стресса [3].Даже полное совпадение по генам HLAу донора и реципиента не гарантирует успешного исхода трансплантации [1]. Поэтому впоследнее время, многие ученые при изучении маркеров криза трансплантатапридают большое значение минорным генам HLA–MICA/B.Несовместимые доноры по генам MICA/B могут стимулировать выработку антител у пациентов после трансплантации. Специфические антитела против MICA/Bбыли зарегистрированы в сыворотке больных, cотторжением почечного аллотрансплантата [4], чтоуказывает на потенциальную роль этих молекул в иммунопатологии пересаженного органа.Материалы и методы исследования.Работа проводилась на базе отдела молекулярнобиологической диагностики ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови».Исследование было проведено на выборке из 33 реципиентов почечного трансплантата, которые проходили курсовое лечение в отделении нефрологии ГБУЗ «Челябинская областная клиническая больница» с 2010 по 2016 г.Таблица 1Клинические и лабораторные данные о реципиентах
ХарактеристикаДанныеВозрастОт 19 до 64 (средний 40±13 лет)Пол11 женщин (33%), 22 мужчины (67%)Тип пересадки5 родственных (15%), 28 трупных (85%)Тип криза3 по гуморальному (25%), 9 по клеточному (75%)
Данные по клинической картине, характеру течения заболевания были предоставлены врачаминефрологами. Всем пациентам до пересадки был поставлен диагноз хроническая почечная недостаточность последней стадии. Все больные прошли курс стандартной терапии,и, к моменту операции,не имели никаких противопоказаний к трансплантации. После трансплантации все реципиенты получали курс иммуносупрессивной терапии.В контрольную группу для оценки экспрессии генов MICA/B были включены 16 условноздоровых доноров из базы потенциальныхдоноров стволовой клетки ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови».Материал для исследования –периферическая кровь. Материал от обследуемого поступал в лабораторию в день трансплантации, до проведения хирургического вмешательства, и после трансплантации, когда больной проходил плановое обследование в клинике. Из крови реципиентов выделялась общеклеточная фракция не позднее чем через 2 часа после взятия материала. Далее, из общеклеточной фракции выделялась РНК методом гуанидинтиоцианатфенолхлороформнойэкстракции («Вектон», Россия) согласно стандартной процедуре, описанной в инструкциях производителя.Далее с выделенными образцами РНК ставили реакцию обратной транскрипции с использованием randomпраймера(«Синтол», Россия), трифосфатов(«Синтол», Россия), обратной транскриптазы и ингибитора РНКаз, при 37°C. Следующим этапом была постановка реакции амплификации –ПЦР в режиме "реального времени", которую проводили на приборе CFX –BioRad(США).В качествеконтрольного гена для расчета нормировочных значений был использован ген тирозинкиназы –ABL. Данные нашего исследованиямы обрабатывали по принципу прямого сравнения данных. При этом применялось следующее уравнение:R=E(C(T)1C(T)2)~2ΔС(T), где R –относительная концентрация продукта реакции; E –эффективность амплификации гена; C(T)1 –значение индикаторного цикла ПЦР, на котором наблюдается флуоресценция реакционной смеси контрольного гена (ABL); C(T)2 –значение индикаторного цикла ПЦР, на котором наблюдается флуоресценция реакционной смеси исследуемого гена. Для анализируемых генов была проведена оценка эффективности амплификации гена. Во всех случаях коэффициент был рассчитан от 1,98 до 2,01, поэтому в формуле применяли усредненный коэффициент 2. Статистика. В ходе статистического анализа данных использовались методы описательной статистики (рассчитывали среднее значение, а также среднеквадратичное отклонение, Xср±σх). Для оценки достоверности различий при исследовании уровня экспрессии генов использовали непараметрический Uкритерий Уилкоксона –Манна –Уитни. Статистическую обработку результатов исследований проводили на персональном компьютере с применением пакета прикладных программ «Statistica 6.0»для «Windows»и программы «MsExcel»пакета «MsOffice».Результаты исследования и их обсуждение. На первом этапе нашей работы мы провели оценку уровня экспрессии генов MICA/B у реципиентов до и после трансплантации в двух группах, а также у контрольной группы условноздоровых доноров. Результаты представлены в таблице 2.Таблица 2Уровень экспрессии генов MICA/B у условноздоровых доноров и у реципиентов до и после трансплантации
ГенУсловноздоровые доноры (N=16), хср±σхРеципиенты до трансплантации (N=33), хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6 мес. (N=26), хср±σхПосле 12 мес. (N=29), хср±σхMICА0,14±0,060,17±0,090,15±0,090,12±0,05MICВ0,92±0,321,93±1,201,29±0,851,13±0,61
В результате исследованиямы обнаружили, что уровень экспрессии генов MICA в клетках периферической крови намного ниже, чем MICB.Согласно полученным данным, уровень экспрессии генов MICA во всех четырех группах исследования оказался примерно на одном уровне (p>0,05).При исследовании экспрессии генов MICB было обнаружено, что у реципиентов в группе «до трансплантации» уровень экспрессии генов MICB практически в два раза выше, чем у условноздоровых доноров (1,93±1,20; 0,92±0,32 соответственно). Результаты являются статистически достоверными (p<0,05).Также, при сравнении уровня экспрессии генов MICB групп «до трансплантации» с группой реципиентов, которым пересадили почку год назад (1,93±1,20; 1,13±0,61 соответственно) были обнаружены статистически значимых различия (p0,05).Уровень экспрессии генов MICB в обеих группах после трансплантации оказался примерно на одном уровне (1,29±0,85; 1,13±0,61), но несколько выше, чем у условноздоровых доноров (0,92±0,32). Врезультате нашего исследованиямы выяснили, что уровень экспрессии генов MICA не изменяется после трансплантации. Также, исследование показало достоверно повышенный уровень экспрессии генов MICB до трансплантации у реципиентов почечного трансплантата.Так как гены MICA/B считаются маркерами стресса [4,5], повышенная экспрессия генов MICВ до трансплантации может быть связана с клинической картиной текущего заболевания. После трансплантации реципиенты получали иммуносупрессивную терапию, вследствие которой происходило угнетение иммунитета и, предположительно, снижение экспрессии генов MICВ.На втором этапе нашей работы мы сопоставили уровень экспрессии генов MICA/B с развитием криза трансплантата.Из 33 обследованных реципиентов на экспрессию генов MICA/B, криз отторжения был диагностирован у 12 человек (у 3 по гуморальному типу, у 9 по клеточному типу). Для правильной оценки влияния генов MICA/B на развитие криза трансплантата были взяты больные, забор материала у которых проводился в момент установления диагноза.Уровень экспрессии генов MICA до трансплантации и после как у кризовых,так и у некризовых реципиентов находился примерно на одном уровне(p�0,05)(таблица 3).Таблица 3Уровень экспрессии генов MICA у условноздоровых доноров и у реципиентов при кризе и без него
Уровень экспрессии MICAУсловноздоровые доноры, хср±σхРеципиенты до трансплантации, хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6мес., хср±σхПосле 12мес., хср±σхКриз0,14±0,060,17±0,090,20±0,140,17±0,16Без криза0,18±0,180,17±0,13
При исследовании зависимости развития криза от экспрессии генов MICB (таблица 4), мы обнаружили, что у реципиентов с диагнозом криз отторжениянаблюдается снижение экспрессии в два раза после 12 мес.: до трансплантации экспрессия генов MICB составила 1,93±1,20, а после 12 мес. –0,91±0,62. Данные различия статистически достоверны (р<0,05).Таблица 4Результаты экспрессии генов MICВ у условноздоровых доноров и у реципиентов при кризе и без него
При сравнении группы реципиентов «после 12 мес.» с кризом и без, мы получили, что у реципиентов с кризом в этот период уровень экспрессия генов MICB заметно ниже, чем у реципиентов без криза (0,91±0,62 и 1,72±0,92 соответственно). Обнаруживается статистическая достоверность (р<0,05).Также отметим, что в группе пациентов с кризом трансплантата «после 12 мес.» уровень экспрессии генов MICВ практически равна результатам исследования этих же генов в группе условноздоровых доноров (0,91±0,62 и 0,92±0,31 соответственно).По литературным данным, большинство исследований указывают на увеличение экспрессии генов MICA/B при кризе трансплантата [4,6,7,8]. Тем неменее, некоторые исследования [9,10]не показали корреляцию между уровнемэкспрессииMICAи состоянием почечного трансплантата.Возможно, наши данные не совпадают с литературными, потому что большинство исследований проводят, изучая экспрессию генов MICA/B в клетках биопсии почечного трансплантата, а мы исследовали общеклеточную фракцию из периферической крови.По результатам нашего исследования можно сделать выводы:1. Уровень экспрессии генов MICAне изменяется после трансплантации и не ассоциируется с кризом отторжения.Уровень экспрессии MICBУсловноздоровые доноры,хср±σхРеципиенты до трансплантации, хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6 мес., хср±σхПосле 12 мес., хср±σхКриз0,92±0,311,93±1,201,98±2,000,91±0,62Без криза1,60±1,181,72±0,922. Уровень экспрессии генов MICBдо трансплантации достоверно увеличен по сравнению с уровнем экспрессии у реципиентов, которым пересадили почку год назад.3. У реципиентов с диагнозом криз отторжениянаблюдается достоверное снижение уровня экспрессии генов MICB.Несомненно, значение генов MICA/B в трансплантации почки велико. Исследование генов MICA/B может внести значительный вклад в изучение иммунного ответа у несовпадающих доноров и реципиентов.
Ссылки на источники1.Ватазин А. В., Зулькарнаев А. Б., Дмитриева Н. Г., Яковчик О. Н., ФедулкинаВ. А. Роль системы HLA в отторжении почечного трансплантата // Альманах клинической медицины. –2013. –№ 29. –URL: http://cyberleninka.ru/article/n/rolsistemyhlavottorzheniipochechnogotransplantata[дата обращения: 25.04.2017].2.Абакушина Е. В., Кузьмина Е. Г. Стрессиндуцированные молекулы MICA/B и их роль в развитии онкологических заболеваний // Молекулярная медицина. –2012. –№ 2. –С. 16–20.3.Pabon M. A., Navarro C. E., Martin R. et al. Minor histocompatibility antigens as risk factor for poor prognosis in kidney transplantation // Transplantation Proceedings. –2011. –Vol. 43, № 9. –P. 3319–3323.4.Hankey K. G., Drachenberg C. B., Papadimitriou J. C., Klassen D. K., Philosophe B., Bartlett S. T., Groh V., Spies T., Mann D. L. MIC expression in renal and pancreatic allografts // Transplantation. –2002. –Vol. 73, № 2. –P. 304306.5.Matilde R., BicalhoM.G. MICA and NKG2D: Is There an Impact on Kidney Transplant Outcome? // Frontiers in Immunology. –2017. –Vol. 8, №179 (february). –URL: https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00179(датаобращения: 25.04.2017).6.Quiroga I., Salio M., Koo D. D. H., Cerundolo L., Shepherd D., Cerundolo V., Fuggle S. V. Expression of MHC Class I Related Chain B (MICB) Molecules on Renal Transplant Biopsies // Transplantation. –2006. –Vol. 81, № 8. –P. 1196–1203.7.Mizutani K., Terasaki P., Bignon J.D., Hourmant M., CesbronGautier A., Shih R.N. et al.Association of kidney transplant failure and antibodies against MICA // Human Immunology. –2006. –Vol. 67, №9. –P. 683–691.8.Tonnerre P., Gerard N., Chatelais M., PoliC., Allard S., Cury S. et al.MICA variant promotes allosensitization after kidney transplantation//J Am Soc Nephrolojy. –2013. –Vol. 24, №6. –P. 954–966.9.Lemy A., Andrien M., Wissing K.M., Ryhahi K., Vandersarren A., Racape J. et al.Major histocompatibility complex class 1 chainrelated antigen a antibodies: sensitizing events and impact on renal graft outcomes// Transplantation. –2010. –Vol. 90, № 2. –P. 168–174.10.Racca A.L, Veaute C.M., Bailat A.,S., Gaite L., Arriola M., Hajos S.E. etal. Expression of HLAG and MICA mRNA in renal allograft // Transplant Immunology. –2009. –Vol. 21, № 1. –P. 10–12.
Хромова Елена Борисовна,кандидат биологических наук, доцент кафедры микробиологии, иммунологии и общей биологии ФГБОУ ВО «Челябинский государственный университет», г.Челябинскeb_sh@mail.ru
Вавилов Михаил Николаевич,биолог отдела молекулярнобиологической диагностики ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови», г. Челябинскvavlakhim@mail.ru
Журавлёва Людмила Юрьевна,заведующая отделением ГБУЗ «Челябинская областная клиническая больница» г.Челябинскmilana_1610@mail.ru
Оценка уровня экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации почки
Аннотация. MICA и MICB являются высокополиморфными генами, расположенными рядом с локусами HLAI класса, и экспрессируютсяна клетках в ответ на стресс. Несовместимые доноры и реципиенты по антигенам MIC могут стимулировать выработку антител к ним. Мы исследовали уровень экспрессии генов MICA и MICB до и после трансплантации и соотнесли изменения с клиническими событиями.Ключевые слова: экспрессия генов, MICА, MICВ, трансплантация почки.
Гены MICA и MICB (MICA/B) располагаются на коротком плече 6 хромосомы рядом с генами HLA I класса:HLA A и B (MHC class I chainrelated antigenA, В –MICA, MICB) и являются минорными антигенами гистосовместимости [1].MICA/B являются лигандом молекулы NKG2D –активирующего рецептора клеток NK и CD8 [2,1]. Связываясь с лигандом, они способны активировать клетки CD4 и CD8, инициируя иммунный ответ, проявляющийся в виде реакции отторжения даже при отсутствии HLAантител [1].В физиологических условиях белки MICA/B представлены в основном на поверхности эпителиальных клеток желудочнокишечного тракта, но начинают активно экспрессироваться на поверхности других клеток при вирусных инфекциях, действии стресса [3].Даже полное совпадение по генам HLAу донора и реципиента не гарантирует успешного исхода трансплантации [1]. Поэтому впоследнее время, многие ученые при изучении маркеров криза трансплантатапридают большое значение минорным генам HLA–MICA/B.Несовместимые доноры по генам MICA/B могут стимулировать выработку антител у пациентов после трансплантации. Специфические антитела против MICA/Bбыли зарегистрированы в сыворотке больных, cотторжением почечного аллотрансплантата [4], чтоуказывает на потенциальную роль этих молекул в иммунопатологии пересаженного органа.Материалы и методы исследования.Работа проводилась на базе отдела молекулярнобиологической диагностики ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови».Исследование было проведено на выборке из 33 реципиентов почечного трансплантата, которые проходили курсовое лечение в отделении нефрологии ГБУЗ «Челябинская областная клиническая больница» с 2010 по 2016 г.Таблица 1Клинические и лабораторные данные о реципиентах
ХарактеристикаДанныеВозрастОт 19 до 64 (средний 40±13 лет)Пол11 женщин (33%), 22 мужчины (67%)Тип пересадки5 родственных (15%), 28 трупных (85%)Тип криза3 по гуморальному (25%), 9 по клеточному (75%)
Данные по клинической картине, характеру течения заболевания были предоставлены врачаминефрологами. Всем пациентам до пересадки был поставлен диагноз хроническая почечная недостаточность последней стадии. Все больные прошли курс стандартной терапии,и, к моменту операции,не имели никаких противопоказаний к трансплантации. После трансплантации все реципиенты получали курс иммуносупрессивной терапии.В контрольную группу для оценки экспрессии генов MICA/B были включены 16 условноздоровых доноров из базы потенциальныхдоноров стволовой клетки ГБУЗ «Челябинская областная станция переливания крови».Материал для исследования –периферическая кровь. Материал от обследуемого поступал в лабораторию в день трансплантации, до проведения хирургического вмешательства, и после трансплантации, когда больной проходил плановое обследование в клинике. Из крови реципиентов выделялась общеклеточная фракция не позднее чем через 2 часа после взятия материала. Далее, из общеклеточной фракции выделялась РНК методом гуанидинтиоцианатфенолхлороформнойэкстракции («Вектон», Россия) согласно стандартной процедуре, описанной в инструкциях производителя.Далее с выделенными образцами РНК ставили реакцию обратной транскрипции с использованием randomпраймера(«Синтол», Россия), трифосфатов(«Синтол», Россия), обратной транскриптазы и ингибитора РНКаз, при 37°C. Следующим этапом была постановка реакции амплификации –ПЦР в режиме "реального времени", которую проводили на приборе CFX –BioRad(США).В качествеконтрольного гена для расчета нормировочных значений был использован ген тирозинкиназы –ABL. Данные нашего исследованиямы обрабатывали по принципу прямого сравнения данных. При этом применялось следующее уравнение:R=E(C(T)1C(T)2)~2ΔС(T), где R –относительная концентрация продукта реакции; E –эффективность амплификации гена; C(T)1 –значение индикаторного цикла ПЦР, на котором наблюдается флуоресценция реакционной смеси контрольного гена (ABL); C(T)2 –значение индикаторного цикла ПЦР, на котором наблюдается флуоресценция реакционной смеси исследуемого гена. Для анализируемых генов была проведена оценка эффективности амплификации гена. Во всех случаях коэффициент был рассчитан от 1,98 до 2,01, поэтому в формуле применяли усредненный коэффициент 2. Статистика. В ходе статистического анализа данных использовались методы описательной статистики (рассчитывали среднее значение, а также среднеквадратичное отклонение, Xср±σх). Для оценки достоверности различий при исследовании уровня экспрессии генов использовали непараметрический Uкритерий Уилкоксона –Манна –Уитни. Статистическую обработку результатов исследований проводили на персональном компьютере с применением пакета прикладных программ «Statistica 6.0»для «Windows»и программы «MsExcel»пакета «MsOffice».Результаты исследования и их обсуждение. На первом этапе нашей работы мы провели оценку уровня экспрессии генов MICA/B у реципиентов до и после трансплантации в двух группах, а также у контрольной группы условноздоровых доноров. Результаты представлены в таблице 2.Таблица 2Уровень экспрессии генов MICA/B у условноздоровых доноров и у реципиентов до и после трансплантации
ГенУсловноздоровые доноры (N=16), хср±σхРеципиенты до трансплантации (N=33), хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6 мес. (N=26), хср±σхПосле 12 мес. (N=29), хср±σхMICА0,14±0,060,17±0,090,15±0,090,12±0,05MICВ0,92±0,321,93±1,201,29±0,851,13±0,61
В результате исследованиямы обнаружили, что уровень экспрессии генов MICA в клетках периферической крови намного ниже, чем MICB.Согласно полученным данным, уровень экспрессии генов MICA во всех четырех группах исследования оказался примерно на одном уровне (p>0,05).При исследовании экспрессии генов MICB было обнаружено, что у реципиентов в группе «до трансплантации» уровень экспрессии генов MICB практически в два раза выше, чем у условноздоровых доноров (1,93±1,20; 0,92±0,32 соответственно). Результаты являются статистически достоверными (p<0,05).Также, при сравнении уровня экспрессии генов MICB групп «до трансплантации» с группой реципиентов, которым пересадили почку год назад (1,93±1,20; 1,13±0,61 соответственно) были обнаружены статистически значимых различия (p0,05).Уровень экспрессии генов MICB в обеих группах после трансплантации оказался примерно на одном уровне (1,29±0,85; 1,13±0,61), но несколько выше, чем у условноздоровых доноров (0,92±0,32). Врезультате нашего исследованиямы выяснили, что уровень экспрессии генов MICA не изменяется после трансплантации. Также, исследование показало достоверно повышенный уровень экспрессии генов MICB до трансплантации у реципиентов почечного трансплантата.Так как гены MICA/B считаются маркерами стресса [4,5], повышенная экспрессия генов MICВ до трансплантации может быть связана с клинической картиной текущего заболевания. После трансплантации реципиенты получали иммуносупрессивную терапию, вследствие которой происходило угнетение иммунитета и, предположительно, снижение экспрессии генов MICВ.На втором этапе нашей работы мы сопоставили уровень экспрессии генов MICA/B с развитием криза трансплантата.Из 33 обследованных реципиентов на экспрессию генов MICA/B, криз отторжения был диагностирован у 12 человек (у 3 по гуморальному типу, у 9 по клеточному типу). Для правильной оценки влияния генов MICA/B на развитие криза трансплантата были взяты больные, забор материала у которых проводился в момент установления диагноза.Уровень экспрессии генов MICA до трансплантации и после как у кризовых,так и у некризовых реципиентов находился примерно на одном уровне(p�0,05)(таблица 3).Таблица 3Уровень экспрессии генов MICA у условноздоровых доноров и у реципиентов при кризе и без него
Уровень экспрессии MICAУсловноздоровые доноры, хср±σхРеципиенты до трансплантации, хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6мес., хср±σхПосле 12мес., хср±σхКриз0,14±0,060,17±0,090,20±0,140,17±0,16Без криза0,18±0,180,17±0,13
При исследовании зависимости развития криза от экспрессии генов MICB (таблица 4), мы обнаружили, что у реципиентов с диагнозом криз отторжениянаблюдается снижение экспрессии в два раза после 12 мес.: до трансплантации экспрессия генов MICB составила 1,93±1,20, а после 12 мес. –0,91±0,62. Данные различия статистически достоверны (р<0,05).Таблица 4Результаты экспрессии генов MICВ у условноздоровых доноров и у реципиентов при кризе и без него
При сравнении группы реципиентов «после 12 мес.» с кризом и без, мы получили, что у реципиентов с кризом в этот период уровень экспрессия генов MICB заметно ниже, чем у реципиентов без криза (0,91±0,62 и 1,72±0,92 соответственно). Обнаруживается статистическая достоверность (р<0,05).Также отметим, что в группе пациентов с кризом трансплантата «после 12 мес.» уровень экспрессии генов MICВ практически равна результатам исследования этих же генов в группе условноздоровых доноров (0,91±0,62 и 0,92±0,31 соответственно).По литературным данным, большинство исследований указывают на увеличение экспрессии генов MICA/B при кризе трансплантата [4,6,7,8]. Тем неменее, некоторые исследования [9,10]не показали корреляцию между уровнемэкспрессииMICAи состоянием почечного трансплантата.Возможно, наши данные не совпадают с литературными, потому что большинство исследований проводят, изучая экспрессию генов MICA/B в клетках биопсии почечного трансплантата, а мы исследовали общеклеточную фракцию из периферической крови.По результатам нашего исследования можно сделать выводы:1. Уровень экспрессии генов MICAне изменяется после трансплантации и не ассоциируется с кризом отторжения.Уровень экспрессии MICBУсловноздоровые доноры,хср±σхРеципиенты до трансплантации, хср±σхРеципиенты после трансплантацииДо 6 мес., хср±σхПосле 12 мес., хср±σхКриз0,92±0,311,93±1,201,98±2,000,91±0,62Без криза1,60±1,181,72±0,922. Уровень экспрессии генов MICBдо трансплантации достоверно увеличен по сравнению с уровнем экспрессии у реципиентов, которым пересадили почку год назад.3. У реципиентов с диагнозом криз отторжениянаблюдается достоверное снижение уровня экспрессии генов MICB.Несомненно, значение генов MICA/B в трансплантации почки велико. Исследование генов MICA/B может внести значительный вклад в изучение иммунного ответа у несовпадающих доноров и реципиентов.
Ссылки на источники1.Ватазин А. В., Зулькарнаев А. Б., Дмитриева Н. Г., Яковчик О. Н., ФедулкинаВ. А. Роль системы HLA в отторжении почечного трансплантата // Альманах клинической медицины. –2013. –№ 29. –URL: http://cyberleninka.ru/article/n/rolsistemyhlavottorzheniipochechnogotransplantata[дата обращения: 25.04.2017].2.Абакушина Е. В., Кузьмина Е. Г. Стрессиндуцированные молекулы MICA/B и их роль в развитии онкологических заболеваний // Молекулярная медицина. –2012. –№ 2. –С. 16–20.3.Pabon M. A., Navarro C. E., Martin R. et al. Minor histocompatibility antigens as risk factor for poor prognosis in kidney transplantation // Transplantation Proceedings. –2011. –Vol. 43, № 9. –P. 3319–3323.4.Hankey K. G., Drachenberg C. B., Papadimitriou J. C., Klassen D. K., Philosophe B., Bartlett S. T., Groh V., Spies T., Mann D. L. MIC expression in renal and pancreatic allografts // Transplantation. –2002. –Vol. 73, № 2. –P. 304306.5.Matilde R., BicalhoM.G. MICA and NKG2D: Is There an Impact on Kidney Transplant Outcome? // Frontiers in Immunology. –2017. –Vol. 8, №179 (february). –URL: https://doi.org/10.3389/fimmu.2017.00179(датаобращения: 25.04.2017).6.Quiroga I., Salio M., Koo D. D. H., Cerundolo L., Shepherd D., Cerundolo V., Fuggle S. V. Expression of MHC Class I Related Chain B (MICB) Molecules on Renal Transplant Biopsies // Transplantation. –2006. –Vol. 81, № 8. –P. 1196–1203.7.Mizutani K., Terasaki P., Bignon J.D., Hourmant M., CesbronGautier A., Shih R.N. et al.Association of kidney transplant failure and antibodies against MICA // Human Immunology. –2006. –Vol. 67, №9. –P. 683–691.8.Tonnerre P., Gerard N., Chatelais M., PoliC., Allard S., Cury S. et al.MICA variant promotes allosensitization after kidney transplantation//J Am Soc Nephrolojy. –2013. –Vol. 24, №6. –P. 954–966.9.Lemy A., Andrien M., Wissing K.M., Ryhahi K., Vandersarren A., Racape J. et al.Major histocompatibility complex class 1 chainrelated antigen a antibodies: sensitizing events and impact on renal graft outcomes// Transplantation. –2010. –Vol. 90, № 2. –P. 168–174.10.Racca A.L, Veaute C.M., Bailat A.,S., Gaite L., Arriola M., Hajos S.E. etal. Expression of HLAG and MICA mRNA in renal allograft // Transplant Immunology. –2009. –Vol. 21, № 1. –P. 10–12.
