Сезонные нарушения процессов метаболизма у коров при технологическом стрессе
Международная
публикация
Выпуск:
ART 96227
Библиографическое описание статьи для цитирования:
Ермакова
Н.
В. Сезонные нарушения процессов метаболизма у коров при технологическом стрессе // Научно-методический электронный журнал «Концепт». –
2016. – Т. 15. – С.
1541–1545. – URL:
http://e-koncept.ru/2016/96227.htm.
Аннотация. Показаны сезонные изменения белкового, углеводного и липидного обмена у коров при технологическом стрессе, сопровождающемся нарушением равновесия в системе перекисное окисление липидов – антиоксидантная защита (ПОЛ-АОЗ) в условиях позднего зимне-стойлового периода.
Ключевые слова:
коровы, технологический стресс, белковый обмен, углеводный обмен, липидный обмен, перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита
Текст статьи
Ермакова Наталья Владимировна,кандидат биологических наук, доцент кафедры химии, ФГБОУ ВО «Орловский государственный аграрный университет», г. Орелchemistrysend@yandex.ru
Сезонные нарушения процессов метаболизма у коров при технологическом стрессе
Аннотация. Показанысезонные изменения белкового, углеводного и липидного обмена у коров при технологическом стрессе, сопровождающемся нарушением равновесия в системе перекисное окисление липидов антиоксидантная защита(ПОЛАОЗ)в условиях позднего зимнестойлового периода. Ключевые слова:коровы, технологический стресс, белковый обмен, углеводный обмен, липидный обмен, перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита.
Производство молока, наряду с производством зерна и мяса, составляет основу агропромышленного сектора как любого отдельного региона, так и страныв целом. Эти отрасли АПК обеспечиваютнаселение продуктами первой необходимости, и именно от их состояния и конкурентоспособностив первую очередь зависит продовольственная безопасность России, а также ее роль на мировом рынке производителей сельскохозяйственной продукции.В настоящее время наша страна занимает шестое место в мире по производству молокаиявляется крупнейшим мировым импортером[1]. Россия завозит порядка 8 млн. т молока и молочной продукции, но даже,несмотря на это, потребление молока и молочных продуктов на душу населения составляет порядка 214кг при рациональнойнормев 340кг. В сложившихся условиях важнейшимфактором развития молочного скотоводстваи повышения его эффективности является обеспечение физиологически адекватных условий содержания и кормления животных, а в случае невозможности создания таких условий искусственная коррекция адаптационных процессов с помощью специально разработанных препаратов. Только тогда продуктивный потенциал животных будет реализован наиболее полно. Данная работа была выполнена на молочном поголовье коров чёрнопёстрой породы.В ходе эксперимента в первой декаде каждого месяца в течение года по принципу аналогов формировалась группа клинически здоровых животных из 15 голов, находящихся на 34 месяце 23 лактации. Кормление коров в группах осуществлялось в соответствии с рационом, установленным в хозяйстве. Зимой животные экспериментальных групп содержались привязно, в стойлах, без предоставления активного моциона. В стойловый период в помещении отмечался неудовлетворительный температурновлажностный режим (температура воздуха от 2 до +100и влажностьсвыше 90%). Летом коровы находились на пастбище в летних лагерях. Во время постановки эксперимента у всех подопытных животных брали кровь для биохимического исследования. Пробирки с кровью, предназначенные для отделения сыворотки, в лабораторных условияхобводили тонкой стальной спицей по внутренним стенкам и на 2 часа помещали в термостат при температуре +37380С. Получившуюся сыворотку сливали в центрифужные пробирки и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 10мин. Содержание общего белка в сыворотке крови определяли рефрактометрически, альбуминов с помощью набора реактивов ООО «АгатМед» (Россия) по реакции с бромкрезоловым зеленым. Определение каталитической концентрации ферментов переаминирования АЛТ и АСТ проводили с использованием набора реактивов БиоЛаТестАминотрансфераза АсАТАлАТ фирмы «Лахема» (Чехия) путем измерения оптической плотности гидразонов 2оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Для определения показателей липидного обмена также использовали наборы реактивов фирмы «Лахема»: БиоЛаТест Общие липиды, БиоЛаТест Холестерин. Общие липиды при взаимодействии с фосфованилиновым реактивом образуют красное окрашивание, холестерин с ацетангидридом и серной кислотой дают соединение зеленого цвета. Окрашенные растворыколориметрировали. Содержание глюкозы в сыворотке крови определяли глюкозоксидазным методом с помощью диагностических наборов предприятия «ЭКОлаб» (Россия). По результатам исследований среди получившихся 12 групп в качестве контроля была выбрана группа, анализ которой проводился в сентябре в условиях минимального действия стрессфакторов. В этом месяце отмечалось самое низкое содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) (кетодиены, диеновые конъюгаты, малоновый диальдегид) на фоне активного состояния системы антиоксидантной защиты (АОЗ) (антиоксидантные витамины Е, А, С), а также относительно высокие показатели молочной продуктивности коров.В ходе эксперимента установлена сходная динамика по кетодиенам, диеновым конъюгатам и малоновому диальдегиду, выражающаяся в увеличении их концентрации в зимнестойловый период. При этом концентрация первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов была достоверно выше по сравнению с контролем (сентябрь) с первого месяца стойлового содержания коров. Достоверное увеличение концентрации диеновых конъюгатов, кетодиенов, малонового диальдегида по сравнению с контролем (сентябрь) отмечалось с декабря по апрель. По кетодиенам и диеновым конъюгатам максимальный рост отмечался в марте и составил 45,8% (Р<0,01) и 36,1% (Р<0,001) соответственно. В феврале уровень МДА повысился в 2,5 раза (Р<0,001), а в марте в 2,7 раза (Р<0,001).Содержание антиоксидантных витаминов А, Е, С в этот период находилось на нижней границе физиологической нормы, что указывает на нарушение прооксидантноантиоксидантного равновесия и развитие окислительного стресса.Известно, что белковый обмен при стрессе характеризуется повышением в крови общего белка, которое протекает при снижении альбумина и значительном увеличении содержания глобулинов. Снижение альбумина свидетельствует о замедлении процессов обновления белков и клеточных структур организма, а увеличение глобулинов о напряженном состоянии защитной системы крови [2]. Кроме того, рост глобулиновой фракции можно рассматривать как компенсаторную реакцию при недостаточном образовании альбуминов. На практике же нами была установлена тенденция к сохранению значений общего белка крови на примерно одинаковом уровне в течение всего года. Однако с октября по январь отмечался некоторый недостоверный рост этого показателя в пределах 4,2%, а к окончанию зимнестойлового периода (февральапрель) некоторое недостоверное его падение в пределах 4,7%. Кроме того, именно зимнестойловый период сопровождался уменьшением альбуминовой фракции и увеличением глобулиновой, а также снижением А/Г индекса(рис.1). Уже в январе он снизился на 14,1%, в феврале на 23,1%, в марте на 35,9%, в апреле на 6,4%.Низкие значения белкового индекса косвенно могут указывать на развитие у животных кетозов, которые, в свою очередь, провоцируют заболевание маститами. При этом значительное падение уровня альбумина, скорее всего, носило алиментарный характер и не позволило выявить у животных гиперпротеинемию, которая является спутником стресса.
Рис.1 Соотношение альбумин/глобулины в сыворотке крови коров при технологическом стрессе в течение года
Активность ферментов переаминирования аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) в зимнестойловый период имела тенденцию к повышению по сравнению с контролем (сентябрь). По АЛТ достоверный рост составил: в ноябре 18,4% (Р<0,01), в декабре 13,2% (Р<0,05), в январе 21,1% (Р<0,001), в феврале 18,4% (Р<0,05), в марте 23,7% ( Р<0,05). По АСТ начало повышения каталитической концентрации было отмечено в декабре и составило 12,7% (Р<0,05). В январе для АСТ она была выше на 7,3%, в феврале на 10,9% (Р<0,01), в марте на 18,2% (Р<0,05).При этом стоит заметить, что активность АЛТ возрастала быстрее, чем АСТ, что, вероятно, связано с их локализацией в клетке. Увеличению активности ферментов переаминирования также способствовало развитие в поздний стойловый период алиментарного стресса, связанного с несбалансированным кормлением и возможным накоплением нитритов в кормах в ходе их хранения.В живом организме белки служат пластическим материалом, тогда как углеводы и липиды являются важнейшими источниками энергии. Установлено, что повышение гормональной активности при стрессе увеличивает содержание глюкозы в сыворотке крови для покрытия возросших энергетических нужд организма. Однако, начиная с ноября, нами была выявлена тенденция к снижению уровня глюкозы(рис.2). Ее содержание в феврале было ниже физиологической нормы 1,95±0,14 ммоль/л; процент падения составил 20,4% (Р<0,01). Мартовское значение находилось на нижней границе физиологической нормы 2,00±0,26, процент падения составил 18,4%. Достоверно ниже было содержание глюкозы в апрелеи процент падения составил 12,7% (Р<0,05). В условиях длительного воздействия стрессфакторов в зимнестойловый период происходит истощение запасов глюкозы и глигогена, особенно в условиях несбалансированного кормления на фоне недостатка углеводов, избытка кислых кормов и дефицита микроэлементов[3].Кроме того, развитию гипогликемии способствует резкое ограничение в этот период двигательной активности животных гипокинезия [4].При недостаточном обеспечении глюкозой, особенно в разгар лактации, организм стремится компенсировать энергетический дефицит путем сжигания жиров [5]. В результате, во второй половине стойлового периода, у коров отмечалось стойкое повышение содержания общих липидов и холестерина(рис.2). Содержание общих липидов в январе было выше по сравнению с контролем (сентябрь) на 14,8% (Р<0,05), в феврале на 17,6% (Р<0,05), в марте на 17,2%, в апреле на 10,1%. 0%20%40%60%80%100%сентябрьоктябрьноябрьдекабрьянварьфевральмартапрельмайиюньиюльавгустАльбумин,г/лГлобулины,г/лСходная динамика была выявлена и по уровню холестерина. В январе он вырос на 6%, в феврале на 29% (Р<0,01), в марте на 25,5%, а в апреле на 14,1%( Р<0,05). Активация липолиза способствует образованию кетоновых тел и развитию кетозов, что ведет к снижению уровня естественной резистентности организма, а также способствует возникновению у коров воспалительных заболеваний, в частности маститов [6].
Рис.2 Сезонная динамика содержания показателей углеводнолипидного обмена в сыворотке крови коровпри технологическом стрессе в течение года
Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют о том, что зимнестойловый период в условиях гиподинамии, нарушения параметров микроклимата и алиментарного стресса является у лактирующих коров наиболее стрессогенным. Это подтверждаетсяизменением показателей белкового, углеводного и липидного обменовна фоне активации процессов ПОЛ и истощения системы АОЗ. Поэтому для решения проблемы профилактики и терапии технологического стресса [7] необходимо предусматривать создание благоприятных условий эксплуатации животных при максимальной оптимизации внешней среды, особенно в поздний зимнестойловый период. Сюда входят мероприятия по созданию оптимального зоогигиенического режима и обеспечению животных полноценными кормами, селекционная работа по выведению стрессоустойчивых пород, а также применение наиболее совершенных технологий содержания и разведения крупного рогатого скота [8]. В том случае, когда стрессовых ситуаций избежать невозможно, необходимо проводить фармакологическуюкоррекциюстресса различными антиоксидантами природного и синтетического происхождения. Решение вопросов профилактики и своевременная терапии стресса с целью снижения его негативных последствий позволит сохранить здоровье, повысить продуктивность животных, а также снизить затраты кормов на получение продукции.
Ссылки на источники1.Раджабов Р.Г.Состояние и перспективы развития молочного скотоводства Ростовской области/ Р.Г. Раджабов, Н.В. Иванова // Научный журнал КубГАУ. 2015. №107(03). URL:http://ej.kubagro.ru/2015/03/pdf/82.pdf [Дата обращения 16.03.2016].2.Сергеева, Н.Н. Повышение стрессоустойчивости свиней на откорме антиоксидантами и средствами природного происхождения: дис. … канд. биол. наук / Н.Н.Сергеева. Орёл, 2005.141с.3.Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных / Е.А.Васильева.М.: Агропромиздат, 2000. 359с.4.Хрусталёва, И.В. Гиподинамия зловещий фактор/ И.В.Хрусталёва // Ветеринария с.х. животных. 2006. №11. С.37.5.Громыко, Е.В. Оценка состояния организма коров методами биохимии / Е.В.Громыко // Экологический вестник Северного Кавказа. 2005. №2.С.8094. 0%20%40%60%80%100%сентябрьоктябрьноябрьдекабрьянварьфевральмартапрельмайиюньиюльавгустОбщие липиды, г/лХолестерин, ммоль/лГлюкоза, ммоль/л6.Невинская, Н.А. Повышение лечебного эффекта при маститах у коров / Н.А.Невинская, А.М.Булгаков, В.В.Королев // Вестник Алтайского государственного аграрного университета.2007.№5(31). С.3443.7.Плященко, С.И. Стрессы у сельскохозяйственных животных / С.И. Плященко, В.Т.Сидоров. М.: Агропромиздат, 1987. 192с.8.Тихонов, С.Л. Стресс можно уменьшить / С.Л.Тихонов, Н.Тихонова, А. Степанов // Животноводство России. 2007. №3. С.33.
Сезонные нарушения процессов метаболизма у коров при технологическом стрессе
Аннотация. Показанысезонные изменения белкового, углеводного и липидного обмена у коров при технологическом стрессе, сопровождающемся нарушением равновесия в системе перекисное окисление липидов антиоксидантная защита(ПОЛАОЗ)в условиях позднего зимнестойлового периода. Ключевые слова:коровы, технологический стресс, белковый обмен, углеводный обмен, липидный обмен, перекисное окисление липидов, антиоксидантная защита.
Производство молока, наряду с производством зерна и мяса, составляет основу агропромышленного сектора как любого отдельного региона, так и страныв целом. Эти отрасли АПК обеспечиваютнаселение продуктами первой необходимости, и именно от их состояния и конкурентоспособностив первую очередь зависит продовольственная безопасность России, а также ее роль на мировом рынке производителей сельскохозяйственной продукции.В настоящее время наша страна занимает шестое место в мире по производству молокаиявляется крупнейшим мировым импортером[1]. Россия завозит порядка 8 млн. т молока и молочной продукции, но даже,несмотря на это, потребление молока и молочных продуктов на душу населения составляет порядка 214кг при рациональнойнормев 340кг. В сложившихся условиях важнейшимфактором развития молочного скотоводстваи повышения его эффективности является обеспечение физиологически адекватных условий содержания и кормления животных, а в случае невозможности создания таких условий искусственная коррекция адаптационных процессов с помощью специально разработанных препаратов. Только тогда продуктивный потенциал животных будет реализован наиболее полно. Данная работа была выполнена на молочном поголовье коров чёрнопёстрой породы.В ходе эксперимента в первой декаде каждого месяца в течение года по принципу аналогов формировалась группа клинически здоровых животных из 15 голов, находящихся на 34 месяце 23 лактации. Кормление коров в группах осуществлялось в соответствии с рационом, установленным в хозяйстве. Зимой животные экспериментальных групп содержались привязно, в стойлах, без предоставления активного моциона. В стойловый период в помещении отмечался неудовлетворительный температурновлажностный режим (температура воздуха от 2 до +100и влажностьсвыше 90%). Летом коровы находились на пастбище в летних лагерях. Во время постановки эксперимента у всех подопытных животных брали кровь для биохимического исследования. Пробирки с кровью, предназначенные для отделения сыворотки, в лабораторных условияхобводили тонкой стальной спицей по внутренним стенкам и на 2 часа помещали в термостат при температуре +37380С. Получившуюся сыворотку сливали в центрифужные пробирки и центрифугировали при 2000 об/мин в течение 10мин. Содержание общего белка в сыворотке крови определяли рефрактометрически, альбуминов с помощью набора реактивов ООО «АгатМед» (Россия) по реакции с бромкрезоловым зеленым. Определение каталитической концентрации ферментов переаминирования АЛТ и АСТ проводили с использованием набора реактивов БиоЛаТестАминотрансфераза АсАТАлАТ фирмы «Лахема» (Чехия) путем измерения оптической плотности гидразонов 2оксоглутаровой и пировиноградной кислот в щелочной среде. Для определения показателей липидного обмена также использовали наборы реактивов фирмы «Лахема»: БиоЛаТест Общие липиды, БиоЛаТест Холестерин. Общие липиды при взаимодействии с фосфованилиновым реактивом образуют красное окрашивание, холестерин с ацетангидридом и серной кислотой дают соединение зеленого цвета. Окрашенные растворыколориметрировали. Содержание глюкозы в сыворотке крови определяли глюкозоксидазным методом с помощью диагностических наборов предприятия «ЭКОлаб» (Россия). По результатам исследований среди получившихся 12 групп в качестве контроля была выбрана группа, анализ которой проводился в сентябре в условиях минимального действия стрессфакторов. В этом месяце отмечалось самое низкое содержание продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) (кетодиены, диеновые конъюгаты, малоновый диальдегид) на фоне активного состояния системы антиоксидантной защиты (АОЗ) (антиоксидантные витамины Е, А, С), а также относительно высокие показатели молочной продуктивности коров.В ходе эксперимента установлена сходная динамика по кетодиенам, диеновым конъюгатам и малоновому диальдегиду, выражающаяся в увеличении их концентрации в зимнестойловый период. При этом концентрация первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов была достоверно выше по сравнению с контролем (сентябрь) с первого месяца стойлового содержания коров. Достоверное увеличение концентрации диеновых конъюгатов, кетодиенов, малонового диальдегида по сравнению с контролем (сентябрь) отмечалось с декабря по апрель. По кетодиенам и диеновым конъюгатам максимальный рост отмечался в марте и составил 45,8% (Р<0,01) и 36,1% (Р<0,001) соответственно. В феврале уровень МДА повысился в 2,5 раза (Р<0,001), а в марте в 2,7 раза (Р<0,001).Содержание антиоксидантных витаминов А, Е, С в этот период находилось на нижней границе физиологической нормы, что указывает на нарушение прооксидантноантиоксидантного равновесия и развитие окислительного стресса.Известно, что белковый обмен при стрессе характеризуется повышением в крови общего белка, которое протекает при снижении альбумина и значительном увеличении содержания глобулинов. Снижение альбумина свидетельствует о замедлении процессов обновления белков и клеточных структур организма, а увеличение глобулинов о напряженном состоянии защитной системы крови [2]. Кроме того, рост глобулиновой фракции можно рассматривать как компенсаторную реакцию при недостаточном образовании альбуминов. На практике же нами была установлена тенденция к сохранению значений общего белка крови на примерно одинаковом уровне в течение всего года. Однако с октября по январь отмечался некоторый недостоверный рост этого показателя в пределах 4,2%, а к окончанию зимнестойлового периода (февральапрель) некоторое недостоверное его падение в пределах 4,7%. Кроме того, именно зимнестойловый период сопровождался уменьшением альбуминовой фракции и увеличением глобулиновой, а также снижением А/Г индекса(рис.1). Уже в январе он снизился на 14,1%, в феврале на 23,1%, в марте на 35,9%, в апреле на 6,4%.Низкие значения белкового индекса косвенно могут указывать на развитие у животных кетозов, которые, в свою очередь, провоцируют заболевание маститами. При этом значительное падение уровня альбумина, скорее всего, носило алиментарный характер и не позволило выявить у животных гиперпротеинемию, которая является спутником стресса.
Рис.1 Соотношение альбумин/глобулины в сыворотке крови коров при технологическом стрессе в течение года
Активность ферментов переаминирования аланинаминотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) в зимнестойловый период имела тенденцию к повышению по сравнению с контролем (сентябрь). По АЛТ достоверный рост составил: в ноябре 18,4% (Р<0,01), в декабре 13,2% (Р<0,05), в январе 21,1% (Р<0,001), в феврале 18,4% (Р<0,05), в марте 23,7% ( Р<0,05). По АСТ начало повышения каталитической концентрации было отмечено в декабре и составило 12,7% (Р<0,05). В январе для АСТ она была выше на 7,3%, в феврале на 10,9% (Р<0,01), в марте на 18,2% (Р<0,05).При этом стоит заметить, что активность АЛТ возрастала быстрее, чем АСТ, что, вероятно, связано с их локализацией в клетке. Увеличению активности ферментов переаминирования также способствовало развитие в поздний стойловый период алиментарного стресса, связанного с несбалансированным кормлением и возможным накоплением нитритов в кормах в ходе их хранения.В живом организме белки служат пластическим материалом, тогда как углеводы и липиды являются важнейшими источниками энергии. Установлено, что повышение гормональной активности при стрессе увеличивает содержание глюкозы в сыворотке крови для покрытия возросших энергетических нужд организма. Однако, начиная с ноября, нами была выявлена тенденция к снижению уровня глюкозы(рис.2). Ее содержание в феврале было ниже физиологической нормы 1,95±0,14 ммоль/л; процент падения составил 20,4% (Р<0,01). Мартовское значение находилось на нижней границе физиологической нормы 2,00±0,26, процент падения составил 18,4%. Достоверно ниже было содержание глюкозы в апрелеи процент падения составил 12,7% (Р<0,05). В условиях длительного воздействия стрессфакторов в зимнестойловый период происходит истощение запасов глюкозы и глигогена, особенно в условиях несбалансированного кормления на фоне недостатка углеводов, избытка кислых кормов и дефицита микроэлементов[3].Кроме того, развитию гипогликемии способствует резкое ограничение в этот период двигательной активности животных гипокинезия [4].При недостаточном обеспечении глюкозой, особенно в разгар лактации, организм стремится компенсировать энергетический дефицит путем сжигания жиров [5]. В результате, во второй половине стойлового периода, у коров отмечалось стойкое повышение содержания общих липидов и холестерина(рис.2). Содержание общих липидов в январе было выше по сравнению с контролем (сентябрь) на 14,8% (Р<0,05), в феврале на 17,6% (Р<0,05), в марте на 17,2%, в апреле на 10,1%. 0%20%40%60%80%100%сентябрьоктябрьноябрьдекабрьянварьфевральмартапрельмайиюньиюльавгустАльбумин,г/лГлобулины,г/лСходная динамика была выявлена и по уровню холестерина. В январе он вырос на 6%, в феврале на 29% (Р<0,01), в марте на 25,5%, а в апреле на 14,1%( Р<0,05). Активация липолиза способствует образованию кетоновых тел и развитию кетозов, что ведет к снижению уровня естественной резистентности организма, а также способствует возникновению у коров воспалительных заболеваний, в частности маститов [6].
Рис.2 Сезонная динамика содержания показателей углеводнолипидного обмена в сыворотке крови коровпри технологическом стрессе в течение года
Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют о том, что зимнестойловый период в условиях гиподинамии, нарушения параметров микроклимата и алиментарного стресса является у лактирующих коров наиболее стрессогенным. Это подтверждаетсяизменением показателей белкового, углеводного и липидного обменовна фоне активации процессов ПОЛ и истощения системы АОЗ. Поэтому для решения проблемы профилактики и терапии технологического стресса [7] необходимо предусматривать создание благоприятных условий эксплуатации животных при максимальной оптимизации внешней среды, особенно в поздний зимнестойловый период. Сюда входят мероприятия по созданию оптимального зоогигиенического режима и обеспечению животных полноценными кормами, селекционная работа по выведению стрессоустойчивых пород, а также применение наиболее совершенных технологий содержания и разведения крупного рогатого скота [8]. В том случае, когда стрессовых ситуаций избежать невозможно, необходимо проводить фармакологическуюкоррекциюстресса различными антиоксидантами природного и синтетического происхождения. Решение вопросов профилактики и своевременная терапии стресса с целью снижения его негативных последствий позволит сохранить здоровье, повысить продуктивность животных, а также снизить затраты кормов на получение продукции.
Ссылки на источники1.Раджабов Р.Г.Состояние и перспективы развития молочного скотоводства Ростовской области/ Р.Г. Раджабов, Н.В. Иванова // Научный журнал КубГАУ. 2015. №107(03). URL:http://ej.kubagro.ru/2015/03/pdf/82.pdf [Дата обращения 16.03.2016].2.Сергеева, Н.Н. Повышение стрессоустойчивости свиней на откорме антиоксидантами и средствами природного происхождения: дис. … канд. биол. наук / Н.Н.Сергеева. Орёл, 2005.141с.3.Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных / Е.А.Васильева.М.: Агропромиздат, 2000. 359с.4.Хрусталёва, И.В. Гиподинамия зловещий фактор/ И.В.Хрусталёва // Ветеринария с.х. животных. 2006. №11. С.37.5.Громыко, Е.В. Оценка состояния организма коров методами биохимии / Е.В.Громыко // Экологический вестник Северного Кавказа. 2005. №2.С.8094. 0%20%40%60%80%100%сентябрьоктябрьноябрьдекабрьянварьфевральмартапрельмайиюньиюльавгустОбщие липиды, г/лХолестерин, ммоль/лГлюкоза, ммоль/л6.Невинская, Н.А. Повышение лечебного эффекта при маститах у коров / Н.А.Невинская, А.М.Булгаков, В.В.Королев // Вестник Алтайского государственного аграрного университета.2007.№5(31). С.3443.7.Плященко, С.И. Стрессы у сельскохозяйственных животных / С.И. Плященко, В.Т.Сидоров. М.: Агропромиздат, 1987. 192с.8.Тихонов, С.Л. Стресс можно уменьшить / С.Л.Тихонов, Н.Тихонова, А. Степанов // Животноводство России. 2007. №3. С.33.